超低分子量蛋白Marker II由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，我公司專注于蛋白質研究產品的研發、生產和供應，為您提供的超低分子量蛋白Marker II質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業的生物試劑銷售公司。公司主要經營血清、抗原、抗體等生物試劑產品，可以為您提供專業的技術服務，以優良的價格、優質的服務、優先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內多家企業、單位建立了良好的長期合作關系，擁有較好的企業信譽和品牌形象。

特別提示：包括超低分子量蛋白Marker III(3.4～100kd)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：超低分子量蛋白Marker III(3.4～100kd)
英文名稱：μltra Low Molecμlar Weight Protein Marker III
產品貨號：RFT046
產品規格：10T(50μl)

本產品包含5種多肽和3種低分子量蛋白質組成，分子量范圍為3.4kD-100kD。可以用來判斷 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用說明：
次收到該產品，室溫融化后，徹底混勻，離心快甩將溶液完全收集到管底，根據需要適量分裝成小管，-20℃貯存，每次取一小管使用；本產品為即用型，融化后既能使用，不能95℃加熱處理。

一. 制膠：
I 配制分離膠
1．按照表一將不同體積的雙蒸水、40%PAA(19:1)、凝膠緩沖液和乙二醇加入到小燒杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混勻5-10秒，以使溶液充分混勻。
3．在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液，然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3 cm的水層，使凝膠表面保持平整。
4．靜置30-60分鐘，待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
表一 (一塊0.75mm mini膠用量)

	分離膠	濃縮膠
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×凝膠緩沖液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(電泳級)	1.8ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必須，不要使用1.0mm和1.5mm的凝膠，盡量使用厚度0.75mm的凝膠，這樣會減少電泳后染色和脫色的時間。
II 配制濃縮膠
去除覆蓋在分離膠上的水層，用濾紙將殘留的水吸去。
1．按照表一將不同體積的雙蒸水、40%PAA(29:1)和凝膠緩沖液加入到小燒杯中混合。
2．加入10%過硫酸銨和TEMED，立即混勻5-10秒，以使溶液充分混勻。
3．將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。
4．靜置30-60分鐘裝待凝膠聚合

二. 電泳：
1. 取一管分裝好的Marker樣品，徹底融化，不要加熱處理，充分混勻后備用。
2. 電泳前，將10×Tris-Tricine-SDS電泳緩沖液用蒸餾水稀釋成1×緩沖液備用。將電泳槽的內外槽加入1×緩沖液，輕柔拔出梳子，將Marker或蛋白樣品(樣品已經過2×Tricine上樣緩沖液處理)加入點樣孔，根據表二條件進行電泳，至藍色指示前沿至分離膠3/4位置時即可停止電泳。整個電泳過程大約需要2-3個小時。
注：如果電泳時間過短，染色時，指示前沿容易遮擋小于5kd的小肽。
表二 多肽電泳條件

恒電壓	150 V
起始電流	45-55 mA
結束電流	10-15 mA
電泳時間	2-3小時

三. 染色
根據常規實驗步驟進行染色和觀察。

儲存條件：-20℃,有效期12個月。

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名稱：膽酸鈉
貨號：BTN131048
規格：5g
本產品用于制備脂質體和分離脂質。HPLC測定其純度＞99%。低紫外吸收(1%溶液的A280＜0.08)。可以重生固定化的多粘菌素B 親和柱。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

名稱：細胞凍存液
貨號：YT951
規格：50ml
本品是一種即用型的培養細胞低溫凍存液，適用于大部分的哺乳動物細胞凍存。如果每管細胞使用1ml細胞凍存液，一個包裝的本產品可以用于約50管細胞的凍存。

本產品是即用型的無菌溶液，待凍存的細胞收集后，加入適量凍存液混勻即可，無需自行配制任何溶液，使用非常便捷。

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃的液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性長期保存起來，在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。同時適度地凍存一定量的細胞，可以防止因細胞被污染或其它意外事件而使細胞無法繼續培養，起到了細胞保種的作用。

細胞凍存和復蘇一般采用“慢凍快融”的方法，該方法能較好地保證細胞存活率。

本細胞凍存液包含了細胞凍存所需的所有組分，主要成分是高糖DMEM、適量澳洲進口優質胎牛血清及DMSO等，并在此基礎上優化了相關組分，可大大提高復蘇時細胞的存活率。

注意事項：
1. 使用前需確保細胞凍存液完全融化，并輕輕混勻。融化后的細胞凍存液置于4℃保存。
2. 請確保凍存前細胞生長情況良好，例如處于對數生長期的細胞，并且凍存時存活率大于90%。
3. 建議細胞凍存在液氮中，可以長時間進行保存。如果置于-80℃保存，保存時間大約為1年。
4. 請使用耐受有機溶劑的marker筆進行標記，以防做的標記被酒精或異丙醇等有機溶劑擦掉，而不能辨識。

儲存條件：-20℃，有效期12個月。

名稱：SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)
貨號：WE0286
規格：200ml
  本產品為配制SDS-PAGE濃縮膠緩沖液，可用于配制各種濃度的變性及非變性PAGE凝膠，方便、快捷。產品中已加入10%SDS,使用時不用另外加入。

操作步驟：
根據目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度，zuì佳膠濃度請參考附表1。

I 灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表2)
1、參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。
注：加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸，是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。
2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和純水在小燒杯或試管中混合。
3、加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。
4、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可)， 然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1 cm的水層，使凝膠表面保持平整。
5、靜置30-60分鐘，待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后，表面凝膠已聚合。

II 灌制濃縮膠(各試劑使用量請參考附表3)
1、去除覆蓋在分離膠上的水層。
2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)濃縮膠緩沖液和純水在一個小燒杯或試管中混合。
3、加入10%過硫酸銨和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。
4、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。
5、將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。
6、靜置10~20分鐘，等待濃縮膠聚合。
7、待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。
8、進行常規電泳操作。

附表1. SDS-PAGE分離膠的濃度與zuì佳分離范圍

SDS-PAGE 分離膠濃度	zuì佳分離范圍
6%膠	50-150 kD
8%膠	30-90 kD
10%膠	20-80 kD
12%膠	12-60 kD
15%膠	10-40 kD

附表2. 配制SDS-PAGE分離膠

分離膠濃度	凝膠體積	所需各組分體積(單位：ml)
		純水	30%Acr-Bis(29:1)	分離膠緩沖液(4×)	10%APS	TEMED
6%	5ml	2.75	1.0	1.25	0.05	0.004
	10ml	5.5	2.0	2.5	0.1	0.008
	15ml	8.25	3.0	3.75	0.15	0.012
	20ml	11	4.0	5	0.2	0.016
8%	5ml	2.42	1.33	1.25	0.05	0.003
	10ml	4.8	2.7	2.5	0.1	0.006
	15ml	7.25	4.0	3.75	0.15	0.009
	20ml	9.7	5.3	5	0.2	0.012
10%	5ml	2.08	1.67	1.25	0.05	0.002
	10ml	4.17	3.33	2.5	0.1	0.004
	15ml	6.25	5.0	3.75	0.15	0.006
	20ml	8.3	6.7	5	0.2	0.008
12%	5ml	1.75	2.0	1.25	0.05	0.002
	10ml	3.5	4.0	2.5	0.1	0.004
	15ml	5.25	6.0	3.75	0.15	0.006
	20ml	7.0	8.0	5	0.2	0.008
15%	5ml	1.25	2.5	1.25	0.05	0.002
	10ml	2.5	5.0	2.5	0.1	0.004
	15ml	3.75	7.5	3.75	0.15	0.006
	20ml	5	10.0	5	0.2	0.008

附表3. 配制5%SDS-PAGE濃縮膠

凝膠體積	所需各組分體積(單位：ml)
	純水	30%Acr-Bis(29:1)	濃縮膠緩沖液(4×)	10%APS	TEMED
2ml	1.14	0.34	0.5	0.02	0.002
4ml	2.28	0.68	1	0.04	0.004
6ml	3.42	1.02	1.5	0.06	0.006
8ml	4.56	1.36	2	0.08	0.008

儲存條件：2～8℃


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