本產品用簡便快速的方法提取得到線粒體。適用于各種植物組織樣本和培養細胞。本產品提取得到的線粒體為完整的具有生物活性的線粒體，可以用于線粒體功能研究、線粒體蛋白提取等各種下游應用。

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產品簡介：

線粒體(mitochondria)是真核細胞中產生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化，并通過偶聯磷酸化生成ATP，供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的。

本產品用簡便快速的方法提取得到線粒體。適用于各種植物組織樣本和培養細胞。

本產品提取得到的線粒體為完整的具有生物活性的線粒體，可以用于線粒體功能研究、線粒體蛋白提取等各種下游應用。

本產品采用非酶法的快速提取方法，可以在一小時內快速提取得到植物線粒體，但是回收率比酶法線粒體提取試劑盒稍低。需要酶法提取試劑盒可以聯系我公司選擇其他貨號的試劑盒，酶法提取得到的線粒體回收率會有增加，但是耗時較長。請根據不同的需要選擇試劑盒。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 移液器 ● 離心機 ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● Dounce勻漿器/勻漿機

● PBS ● 蛋白定量試劑盒 ● 細胞篩（100μm）

使用注意事項：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2、實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

使用方法：

1、取新鮮植物樣本葉片，洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈。1g植物組織樣本用手術剪刀盡可能剪碎。

2、加入2mL提取液A后用勻漿機充分勻漿或者用Dounce勻漿器充分勻漿。

【注】：

● 培養細胞直接收集細胞后直接用Dounce勻漿器勻漿即可，勻漿后加提取液混勻后直接進行后續操作。

● 一般鮮嫩植物葉片樣本，Dounce勻漿器勻漿40-50次。

● 每上下一個來回為一次。

3、將勻漿液用100μm細胞篩過濾。

【注】：

● 沒有細胞篩過濾條件，可以將勻漿液稍微靜置，將大塊未勻漿組織自然沉降，棄沉淀，吸取勻漿液即可。

● 部分黏液較多的樣本類型，不好吸取時，可以將吸頭剪掉一點再吸取。

4、在2000×g力條件下離心10分鐘，棄沉淀，吸取上清。

5、在3000×g力條件下離心10分鐘，棄沉淀，吸取上清。

6、將上清在11000×g離心20分鐘，棄上清，收集沉淀。

7、在沉淀中加入1mL提取液B，充分混勻。

8、在11000×g離心20分鐘，棄上清，收集沉淀。

9、沉淀即為線粒體。

10、用試劑C或合適的其他緩沖液懸浮線粒體，置冰箱備用或直接用于下游實驗。

【注】：

● 可以不用試劑C保存線粒體，根據下游實驗需要用自己的緩沖液保存即可。

● 用試劑C保存線粒體后，需要重新回收線粒體可以在11000×g離心20分鐘收集沉淀。

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