特別提示:包括1μm鏈霉親和素磁珠在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:1μm鏈霉親和素磁珠
英文名稱:Streptavidin
產(chǎn)品貨號(hào):CZ016
產(chǎn)品規(guī)格:1ml/10ml/100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
鏈霉親和素-生物素(SA-Biotin)系統(tǒng)具有高的結(jié)合親和力(Kd=10^-15),在生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。Streptavidin采用蛋白偶聯(lián)技術(shù)將SA共價(jià)連接于固相載體表面,可結(jié)合生物素化抗體、核酸、蛋白等配體分子。本產(chǎn)品采用超順磁性微球,粒徑均一、形貌規(guī)整,有利于方便、快捷地捕獲目標(biāo)分子以及實(shí)現(xiàn)磁性分離。本產(chǎn)品可配套自動(dòng)化設(shè)備進(jìn)行高通量操作。
結(jié)合生物素化分子操作流程(本操作以適用于鏈霉親和素磁珠系列所有產(chǎn)品,詳見(jiàn)產(chǎn)品列表):
1. 使用前準(zhǔn)備
1.1 緩沖液:以下為常用的緩沖液成分,用戶可根據(jù)需要調(diào)整緩沖液的鹽濃度及pH
1.2 Buffer I(適用于結(jié)合生物素化核酸):10 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM EDTA,1 M NaCl,0.01%~0.1% Tween-20
1.3 Buffer II(適用于結(jié)合生物素化抗體/蛋白):PBS,pH 7.4,含0.05% Tween-20,可根據(jù)需要添加0.01%~0.1% BSA
1.4 磁性分離器:可選用磁性分離器,Cat.No.60201,適用于1.5 mL、2 mL或15 mL離心管
1.5 漩渦振蕩器
1.6 旋轉(zhuǎn)混合儀
1.7 移液器及吸頭
1.8 合適的離心管
2. 結(jié)合生物素化核酸
2.1. 將磁珠瓶置于漩渦振蕩器上20 s,振蕩重懸磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的離心管中。將離心 管置于磁性分離器上,靜置1 min(此操作后續(xù)簡(jiǎn)稱為磁性分離),用移液器吸去上清液,從磁性分離器上取下離心管。
備注:用戶可根據(jù)生物素化分子的多少,參考產(chǎn)品信息表中磁珠的載量,計(jì)算需要取用的磁珠量。建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的1~2倍,使磁珠飽和。
2.2. 加入1 mL Buffer I到離心管中,蓋上離心管蓋,充分振蕩重懸磁珠。磁性分離,移去上清液。
備注:當(dāng)步驟2.1取用磁珠體積大于1 mL時(shí),加入與磁珠體積相同的Buffer I。
2.3. 重復(fù)“步驟2.2”一次。
2.4. 加入500 μL的用Buffer I稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為2 mg/mL),充分振蕩重懸磁珠。將離心管置于旋轉(zhuǎn)混合儀上,室溫旋轉(zhuǎn)混合30 min。
2.5. 磁性分離,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管。
2.6. 按“步驟 2.2”的方法洗滌磁珠三次。
2.7. 根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求,加入合適的低鹽緩沖液,重懸磁珠。至此結(jié)合生物素化核酸步驟完成。磁珠可用于后續(xù)操作。
2.8. 用戶可以通過(guò)測(cè)定反應(yīng)前后核酸的濃度,計(jì)算結(jié)合到磁珠上的核酸量﹝(反應(yīng)前濃度-反應(yīng)后濃度)×反應(yīng)溶液體積﹞。
3. 結(jié)合生物素化抗體/蛋白操作流程
3.1 將磁珠瓶置于漩渦振蕩器上20 s,振蕩重懸磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的離心管中。磁性分離,用移液器吸去上清液,從磁性分離器上取下離心管。
備注:用戶可根據(jù)生物素化分子的多少,參考產(chǎn)品信息表中磁珠的載量,計(jì)算需要取用的磁珠量。建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的1~2倍,使磁珠飽和。
3.2 加入1 mL Buffer II到離心管中,蓋上離心管蓋,充分振蕩重懸磁珠。磁性分離,移去上清液。
備注:當(dāng)步驟3.1取用磁珠體積大于1 mL時(shí),加入與磁珠體積相同的Buffer II。
3.3 重復(fù)“步驟3.2” 兩次,共洗滌三次。
3.4 加入1 mL用Buffer II稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL),充分振蕩重懸磁珠。將離心管置于旋轉(zhuǎn)混合儀上,室溫旋轉(zhuǎn)混合60 min。
3.5 磁性分離,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管。
3.6 按“步驟3.2”的方法洗滌磁珠五次。
3.7 根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求,加入Buffer II或其他合適的緩沖液,重懸磁珠。至此結(jié)合生物素化抗體/蛋白步驟完成。磁珠可用于后續(xù)操作。
注意事項(xiàng):
1. 應(yīng)避免對(duì)磁珠進(jìn)行冷凍等操作。
2. 為減少磁珠損失,每次磁性分離的時(shí)間應(yīng)不少于1 min。
3. 從磁珠保存管中移取磁珠前應(yīng)充分震蕩重懸均勻。操作過(guò)程中應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
4. 建議使用質(zhì)量好的移液器吸頭和反應(yīng)管,避免因粘附磁珠及溶液而造成損失。
5. 生物素化分子的大小會(huì)影響磁珠的載量。用戶需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定磁珠對(duì)特定生物素化分子的載量。
6. 生物素化分子的加入量應(yīng)為磁珠載量的1~2倍,以使磁珠飽和。
7. 本產(chǎn)品僅供研究使用。
根據(jù)您的關(guān)注的
1μm鏈霉親和素磁珠,1μm鏈霉親和素磁珠,CZ016,百奧萊博,,,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
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貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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CZ005
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鎳離子螯和His-tag蛋白純化磁珠
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5ml/2×50ml/4×250ml
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CZ009
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肝素瓊脂糖磁珠
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5ml/100ml/1000ml
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CZ022
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羥基磁珠(500nm,10mg/ml)
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5ml/50ml
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CZ023
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羥基磁珠(1000nm,10mg/ml)
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5ml/50ml
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CZ024
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羥基磁珠(1000nm,20mg/ml)
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5ml/50ml
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CZ029
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羧基磁珠(30~150μm)
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5ml/50ml
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CZ032
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氨基磁珠(30~150μm)
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5ml/50ml
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關(guān)注
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CZ022 羥基磁珠(500nm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ023 羥基磁珠(1000nm,10mg/ml) 5ml/50ml
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