平末端克隆試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，本品質量穩定，價位合理，需要平末端克隆試劑盒等克隆與表達產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業的生物試劑銷售公司。公司主要經營血清、抗原、抗體等生物試劑產品，可以為您提供專業的技術服務，以優良的價格、優質的服務、優先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內多家企業、單位建立了良好的長期合作關系，擁有較好的企業信譽和品牌形象。 主營產品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

特別提示：包括平末端克隆試劑盒(不含多克隆位點)(拓撲連接酶技術)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：平末端克隆試劑盒(不含多克隆位點)(拓撲連接酶技術)
英文名稱：Zero Background TOPO-Blunt Cloning Kit (without MCS)
產品貨號：ALH335
產品規格：20次|80次

本試劑盒和傳統的T4連接酶原理不同，它利用了拓撲異構酶可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）、（接近）連接DNA片段的原理采用本公司獨特的工藝制成。

本試劑盒在克隆插入位點兩側不含多克隆酶切位點，需要在PCR擴增引物上導入合適的酶切位點。此時如果使用PCR擴增引物導入的酶切位點進行DNA酶切時，酶切反應將不會受到T載體上其它多克隆酶切位點上的限制酶影響，可以大大提高酶切效率，增加亞克隆成功率。

試劑盒組份(20次)：
TOPO-Blunt Simple Vector(30ng/μl)————20μl
1000bp Control（40ng/μl）————5μl
10×Enhancer———————————20μl

產品特點：
1. 可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）完成連接。
2. 無需冰浴和熱休克，室溫5分鐘內完成轉化；無需1小時復蘇，只需37℃10分鐘復蘇便可以涂板。從連接到涂板只需15-20分鐘。
3. 無自連、零背景，無需繁瑣藍白斑篩選，見到長出的克隆便是有插入的（接近）。
4. 可以連接長達10kb片段（即使連接5kb片段，挑10個菌落，至少8個是有插入的），是目前上zuì簡單、zuì快速、零背景免篩選的TOPO平末端克隆載體。

儲存條件：-20℃，有效期12個月。

本制品別名：TOPO Blunt載體連接試劑盒

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貨號	名稱	規格
BTN81201	pression/BTN81201.html" target="_blank">酵母電轉感受態細胞制備液	20次
BTN60206	pression/BTN60206.html" target="_blank">氨芐青霉素溶液	10mL
BTN120690	pression/BTN120690.html" target="_blank">紅霉素溶液	10mL
YT001	pression/YT001.html" target="_blank">質粒小量抽提試劑盒	50次|200次
WE0251	pression/WE0251.html" target="_blank">0感受態細胞	100μl×10支
WE0252	pression/WE0252.html" target="_blank">DH5α感受態細胞	100μl×10支
WE0254	pression/WE0254.html" target="_blank">BL21(DE3)pLysS感受態細胞	100μl×10支

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名稱：大腸桿菌JM110化學感受態細胞
貨號：BTN130511
規格：10*100μl
 本產品是采用大腸桿菌JM110菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達106。本產品為dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影響。
 菌株基因型為：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等。

使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。

注意事項：
1. 涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。

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