特別提示:包括基因組DNA小量提取試劑盒(適用于動物組織/細菌/昆蟲)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:基因組DNA小量提取試劑盒(適用于動物組織/細菌/昆蟲)
英文名稱:Genomic DNA Mini Preparation Kit with Spin Column
產品貨號:YT013
產品規格:50次
本試劑盒是非常的基因組DNA抽提試劑盒。可以抽提動物組織、鼠尾、培養細胞、細菌、酵母、動物血液、昆蟲以及固定組織的包括基因組DNA在內的總DNA。一個試劑盒通過說明書中提供的不同操作方法,可以抽提除植物樣品外的幾乎所有樣品中的總DNA。
樣品先被蛋白酶K消化,隨后加入適合DNA結合到純化柱上的緩沖液,然后加入到純化柱內。通過高速離心,使DNA在穿過純化柱的瞬間,結合到純化柱上,隨后通過兩次洗滌去除各種雜質,zuì后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個過程無需酚lǜ仿抽提,無需酒精沉淀,樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。
通過本試劑盒純化得到的基因組DNA的長度zuì長可達50kb左右,平均為30kb左右,zuì短為100bp的DNA也可以被純化。如需獲得更長的基因組DNA,對于哺乳動物樣品,包括組織或細胞等,可以使用百奧萊博的(YT012)哺乳動物基因組DNA抽提試劑盒。通過本試劑盒獲得的總DNA,OD260/OD280的范圍通常在1.7至1.9之間。
本試劑盒可以抽提少至數百個細胞,多至25mg組織、0.5-1cm鼠尾、500萬個培養細胞、20億個細菌或5000萬個酵母。樣品用量過多,反而會影響抽提效果。如果待抽提樣品的DNA含量小于5ng,建議加入適當量的carrier DNA,例如poly-dT或其它對后續實驗沒有干擾的DNA,也可以加入適當量的carrier RNA,例如yeast RNA等,以改善抽提效果。
本試劑盒的標準操作步驟抽提得到的總DNA會含有少量RNA,但如果按照可選步驟加入RNase A,就可以獲得不含RNA的高純度總DNA。含有RNA的總DNA可以用于PCR,但對于某些其它的后續反應可能會產生一些影響。
純化柱對于DNA的zuì大容量約為30微克。通常每200萬Hela細胞或500萬淋巴細胞可以抽提得到15-25微克總DNA,每25mg肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA,每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA,每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA,每1.2cm小鼠尾尖或0.3cm大鼠尾尖可以獲得10-25微克總DNA。本試劑盒可以抽提50個樣品的總DNA。
產品組份:
樣品裂解液A——————10ml
樣品裂解液B——————11ml
洗滌液I————————21ml (次使用前加入7ml無水乙醇)
洗滌液II———————16ml (次使用前加入24ml無水乙醇)
洗脫液————————22ml
蛋白酶K————————1.1ml
DNA純化柱及廢液收集管————50套
儲存條件:室溫,有效期一年。(蛋白酶K需-20℃保存)
注意事項:
1.抽提細菌、酵母樣品時還需要一些特定的試劑,詳情請參考相關實驗步驟。
2.如需制備不含RNA的高純度總DNA,需自備RNase A。
3.溫度較低時樣品裂解液A或樣品裂解液B中可能會有沉淀產生,屬正常現象。使用前必須檢查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混勻后使用。
4.次使用前洗滌液I需添加7ml無水乙醇,洗滌液II需添加24ml無水乙醇,混勻,并在瓶上做好標記。
5.本試劑盒需使用55℃水浴,請提前作好準備。
6.除特別說明外,每次Vortex應控制在5-10秒左右。
7.本試劑盒所有操作均在室溫進行,操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。
8.廢液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丟棄。
9.參考使用說明,從某些樣品中抽提總DNA不需要使用樣品裂解液A。
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