特別提示:包括Annexin V-PE/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:Annexin V-PE/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產品貨號:KFS188
產品規格:10T|20T|50T|100T
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V 進行熒光素PE 標記,以標記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。
7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一種核酸染料,它不能通過正常質膜,隨著細胞凋亡、細胞死亡過程,質膜對7-AAD 的通透性逐漸增加,結合細胞凋亡中DNA 的有控降解,在合適波長激發光的激發下可發出明亮的紅色熒光,通過7-AAD 標記DNA 的強弱,將細胞分為三群:7-AAD 強為死亡細胞,7-AAD 弱是凋亡細胞,7-AAD-為正常活力細胞。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性,但其發射波譜較PI 窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 的zuì佳替代品,可與Annexin V-PE 聯合使用。
本試劑盒可應用于培養細胞凋亡檢測(不推薦用于檢測組織樣本)。
注意事項
1. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償的調節。
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