大鼠甲狀旁腺素ELISA 檢測試劑盒生物試劑
發布日期：2012-11-29 瀏覽次數 ：1406
大鼠甲狀旁腺素ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 標本：血清或血漿
試驗原理：
PTH試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知PTH濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PTH和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中PTH的濃度呈比例關系。
自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。
大鼠甲狀旁腺素ELISA 檢測試劑盒
安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
大鼠甲狀旁腺素ELISA 檢測試劑盒
操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
大鼠甲狀旁腺素ELISA 檢測試劑盒
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的PTH標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的PTH含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
o-Anisidine 2-甲氧基苯胺 [90-04-0] 50ml
p-Anisidine 4-甲氧基苯胺 [104-94-9] 100g
Anisole 苯甲醚 [100-66-3] 500ml
Anisomycin, from Streptomyces griseolus 茴香霉素 [22862-76-6] 5mg
Anthrone 蒽酮 [90-44-8] 25g
Antipyrine 安替吡啉 [60-80-0] 25g
D-Biotin D-生物素 [58-85-5] 5g
Anthraquinone 蒽醌 [84-65-1] 25g
Antimony powder 銻粉 [7440-36-0] 100g
Antimony (III) oxide 三氧化二銻 [1309-64-4] 250g
Antimony pentoxide 五氧化二銻 [1314-60-9] 100g
Antipain, dihydrochloride 抗蛋白酶 [37682-72-7] 5mg
Apramycin sulfate 硫酸阿布拉霉素 [65710-07-8] 1g
Aprotinin 抑肽酶 [9087-70-1] 50mg
Aprotinin 抑肽酶 [9087-70-1] 250mg
Aprotinin 抑肽酶 [9087-70-1] 10mg
推薦行情