人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒水平。用純化的人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒,再與HRP標記的血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒濃度。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。





