英文名稱:Human beta cellulin, BTC Elisa Kit
規格:48T/96T
保存條件:2-8℃
產品性狀:液體盒裝
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
用途:此試劑盒僅用于科研實驗,嚴禁用于臨床。
本試劑盒采用夾心法酶聯免疫吸附法,用于體外定量分析人血清、血漿、細胞裂解液或細胞培養上清中BTC的含量。預先包被的抗體是BTC單克隆抗體。檢測相抗體是BTC單克隆抗體,經生物素標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人BTC呈正相關。
β細胞素(betacellulin,BTC)是表皮細胞生長因子家族成員之一,在多器官系統的正常發育過程中起重要作用,尤其高表達于胰腺組織中,提示 β 細胞素可能在胰腺發育和胰腺干細胞的分化中發揮重要作用。
檢測指標:Probetacellulin;Betacellulin;BTC
檢測范圍:15.6pg/ml~1000pg/ml
特異性:系統和其它細胞因子無交叉反應
敏感性:<0.5pg/ml
標本要求:
1. 血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的*一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7)結果判斷:分定性判定和定量判定。
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