植物DNA提取試劑盒說明書

產品編號：BTN60602

規格：50T

產品及特點：

本產品是在植物DNA提取試劑盒基礎上開發的柱式植物基因組DNA提取產品，可以用于多種植物基因組DNA（含葉綠體和線粒體DNA）的快速提取。

1. 純度高，不含污染和抑制劑，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis 等各種后續分子生物學實驗。

2. 產率一般在3-30 μg/100 mg 樣品。OD260/280 一般在1.8 以上。DNA 片段長度一般在40-50 Kb左右。

3. 適用范圍廣，可以使用于大多數植物的各種組織。

4. 不會發生離心柱堵塞現象。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑：

氯fang。

使用方法：

注意：溶液A 和溶液B 容易產生沉淀，溶液B 比較粘稠，用前均需要放置在65℃預熱使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分搖勻。

1. 65℃預熱柱式植物DNA提取試劑盒溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取0.75 mL加入到10 mL塑料離心管中并放置于65℃待用。

2. 稱取植物組織0.1-0.5 g左右，剪成微小的碎片，加入到有溶液A 的10 mL塑料離心管中并短暫勻漿。也可以液氮研磨后將粉末加入到管中(建議不要在陶器或玻璃研缽中破碎細胞，因為二氧化硅會非特異地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。勻漿過程中將產生大量泡沫，屬于正常現象。

3. 將勻漿液(包括植物碎片)全部轉移到新的1.5 mL塑料離心管(此時勻漿液較為粘稠，可將槍頭剪去一截后轉移上清, 不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。

4. 在勻漿液中加入0.5 倍體積預熱的溶液B 到離心管中，顛倒數次混勻。此時溶液中可能有白色絲狀懸浮物產生。（由于溶液B 比較粘稠，可以將1 mL槍頭剪去一截再吸取）。

5. 65℃水浴3-5分鐘。如果室溫放置，DNA 產量會降低10-20%。

6. 加入200 μL自備氯fang，震蕩混勻10-30 秒，此時溶液將呈乳白色。

7. 12,000 rpm 室溫離心2 分鐘。此時上清液將變得透明，中間層有白膜。小心轉移上清液到一個新的1.5 mL 塑料離心管中，避免觸及中間層的白膜。

8. 加入1.5倍體積的溶液C，顛倒混勻后全部轉移到離心吸附柱中，室溫放置至少2分鐘。

9. 12,000 rpm 室溫離心1 分鐘，DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上，倒棄收集管中的穿透液。

10. 將0.5 mL通用洗柱液加入離心柱中，12,000 rpm 室溫離心1 分鐘，棄穿透液。

11. 重復上步操作一次。

12. 空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉移到新的1.5 mL 離心管中。

13. 將離心吸附柱放置在一新的1.5mL 塑料離心管中，加50-100μL DNA 洗脫液2.0，室溫放置3-5 分鐘。

14. 12,000 rpm 室溫離心1分鐘即得植物DNA 溶液。

15. 由于本產品使用的離心吸附柱吸附DNA 的能力較強，可以重復上步操作一次，以洗脫得到更多的DNA。

16. 直接取5-10μL 電泳檢測DNA，其余放冰箱備用。

使用效果：

圖注：用本產品提取0.1g牽牛花葉片基因組DNA，60μL洗脫液洗脫，取15μL檢測。泳道3和4為本產品提取效果，泳道1和2為某公司同類產品提取效果。本公司提取的牽牛花葉片基因組DNA 條帶清晰，產量高。M為本公司Marker，染料為本公司綠如藍核酸染料（BTN70909）。