大鼠神經(jīng)肽Y說明書（NP-Y）Elisa試劑盒代測，素爾提供，出售3萬多種類試劑盒，質(zhì)量穩(wěn)定，重復(fù)性好，價格優(yōu)惠，與五十多家重點科研單位、高校合作，深得客戶認(rèn)可。...

1、 聯(lián)系素爾客服QQ：117:206955 或致電 索取ELISA實驗訂單和樣本信息單表格，詳細(xì)填寫您所需要的指標(biāo)名稱，檢測種屬，實驗?zāi)Ｐ停瑯颖揪幪枺⑶覙?biāo)注后續(xù)是否還有實驗，以便我們及時保存好您的樣本。

2、 聯(lián)系客服索取我們公司地址，郵寄標(biāo)本，放入干冰或充足冰袋，填寫好的ELISA實驗訂單和樣本信息單紙質(zhì)版，隨樣本一起郵寄。

3、 收到樣本后，編號不清楚的地方會及時和您溝通聯(lián)系，3-5個工作日，試劑盒詳細(xì)說明書（試驗中需要的儀器、耗材、試劑、操作步驟，結(jié)果計算方法）同原始數(shù)據(jù)，和實驗報告，發(fā)至您郵箱。

4、 確保售后，您對數(shù)據(jù)有質(zhì)疑或不清楚的地方，會及時和您溝通。

大鼠神經(jīng)肽Y說明書（NP-Y）Elisa試劑盒代測 原理：

酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）的基本原理是：①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。

ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。該法適于測定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本，干擾小可以測到每毫升納克水平的細(xì)胞因子（或受體）的水平。

大鼠神經(jīng)肽Y說明書（NP-Y）Elisa試劑盒代測 需要儀器及耗材：

酶標(biāo)儀：芬蘭（Labsystems Multiskan MS）公司產(chǎn)品

洗板機(jī)：芬蘭（Thermo Labsystems）公司產(chǎn)品

離心機(jī)：微量高速離心機(jī)（國產(chǎn)）

移液器：吉爾森P型移液器(Pipetman)產(chǎn)品

培養(yǎng)箱：隔水式恒溫培養(yǎng)箱（國產(chǎn)）產(chǎn)品

大鼠神經(jīng)肽Y說明書（NP-Y）Elisa試劑盒代測 操作流程：

1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書稀釋好五個梯度，各個梯度每孔加樣量都為50Μl；

2、加樣：分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μL，然后再加待測樣品10μL。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻；

3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30min；

4、配液洗滌：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用；小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30sec后棄去，如此重復(fù)5次，拍干；

5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μL，空白孔除外；

6、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30min；

7、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30sec后棄去，如此重復(fù)5次，拍干；

8、顯色：每孔先加入顯色劑A50μL，再加入顯色劑B50μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15min；

9、終止：每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)；

10、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15min以內(nèi)進(jìn)行。

計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)，OD值為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

大鼠神經(jīng)肽Y說明書（NP-Y）Elisa試劑盒代測 操作注意事項：

1、試劑價格較高，實驗前有任何疑問及實驗中有任何問題請及時與本公司取得聯(lián)系，避免造成損失！

2、試劑盒應(yīng)在2～8℃冰箱內(nèi)儲存，且注意不可凍結(jié)。

3、請勿使用過期的試劑盒或其中的組件或混用不同批次試劑盒的試劑，以免降低靈敏度。

4、0標(biāo)準(zhǔn)品的A450nm<0.6時，表示試劑可能變質(zhì)，請勿使用；顯色劑變藍(lán)，表明已變質(zhì)，請勿使用。

5、將試劑盒內(nèi)試劑稀釋或者改變其濃度將會影響檢測結(jié)果。

6、當(dāng)從冰箱中取出試劑盒進(jìn)行檢測時，應(yīng)將試劑盒于室溫(20～26℃)下放置半小時以上，使其溫度回升至室溫。

7、試劑盒內(nèi)的各種試劑在使用前應(yīng)充分搖勻(酶標(biāo)物溶液輕搖即可，不可起泡)，以確保試劑濃度的均一性。

8、微孔條按需使用，將剩余的微孔條立即放入包裝袋中，于2～8℃干燥密封的條件下保存。

9、向酶標(biāo)板微孔中加入試劑或樣品時，為確保操作的一致性，加液時槍頭應(yīng)垂直懸空至板孔正中央，保證樣液應(yīng)加至孔中央，動作迅速，避免槍頭接觸孔壁，避免樣液濺到孔壁或濺出微孔，造成不必要的非特異性吸附或損失。特別是加入共同試劑(如酶標(biāo)抗體)，由于可能會用到排槍，該操作尤為重要。

10、加樣完畢后，應(yīng)將酶標(biāo)板至于振蕩器或用移液器槍頭輕敲，使孔中液體充分混勻，但需注意的是切勿不可將孔中的液體搖出，影響檢測結(jié)果。

11、樣品前處理注意事項：尿樣，若樣品中出現(xiàn)渾濁或沉淀，可將其至于離心機(jī)中適當(dāng)離心，取其上清液作檢測樣品;肝樣或肉樣，請參照說明書提供的方法進(jìn)行提取。于水浴鍋中提取時，水浴應(yīng)始終保持沸騰，若由于其他原因達(dá)不到所需溫度(但不得低于85℃)，可適當(dāng)延長提取時間，直至組織樣品明顯變色為止(由紅色變黃褐色或白色)，且趁熱進(jìn)行離心，離心力保持在4000g/r以上以保證上清液澄清。

12、如果選擇室溫條件下反應(yīng)，在整個檢測過程中，應(yīng)保持溫度在20～26℃之間，同時為了避免反應(yīng)過程外界環(huán)境因素的影響，酶標(biāo)板上應(yīng)貼上一層薄膜或置于封閉環(huán)境中避光反應(yīng)；如果選擇37℃條件下反應(yīng)，建議在水浴鍋中進(jìn)行，且酶標(biāo)板上也應(yīng)貼上一層薄膜，防止試劑的揮發(fā)。

13、洗板時如果選擇蒸餾水作為洗液，要保證洗滌用水的pH范圍在6～8之間；如果水質(zhì)較差請選擇試劑盒配備的濃縮洗液稀釋后作為洗液。為了確保洗滌的一致性，建議洗滌時采用專門配置的洗板機(jī)，反復(fù)洗滌6次，每次洗滌的體積以溢滿微孔為宜(約300μL)。如用其他方法洗板時，請注意操作方法，避免清洗不徹底或產(chǎn)生交叉污染。

14、在加入酶底物液進(jìn)行顯色時，可向板孔中先加50μL的底物緩沖液，然后再加入50μL的底物液(注意加完后混勻液體)，或者將底物緩沖液和底物液充分混勻后(混勻容器應(yīng)潔凈，現(xiàn)配現(xiàn)用)，再向每孔中加入100μL的混合液。

15、終止液含有1mol/L硫酸溶液，避免皮膚直接接觸，操作時要注意安全。

16、推薦使用高質(zhì)量的吸頭及移液器，且吸頭不可反復(fù)使用(難以清洗干凈)。

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