1.NaHCO3的作用是什么？

與二氧化碳一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定。

2.丙酮酸鈉的作用是什么？

丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒(méi)有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.

3.加入HEPES有何好處？

培養(yǎng)基中常用的Buffer system是碳酸氫鹽，它可提供營(yíng)養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES是一種很強(qiáng)的Buffer，加入HEPES能使細(xì)胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES的貯存液濃度一般為1M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM，即5ml 1M的HEPES加入到200ml完全培養(yǎng)基中。

4.酚紅的作用是什么？

酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。

5.谷氨酰胺的作用是什么？

幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。

試驗(yàn)操作中常配制高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支），分裝使用，-20℃保存。使用時(shí)，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。