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分享使用ELISA試劑盒實用小技巧

發布時間:2021-12-21瀏覽次數:1189返回列表

  Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。


  ELISA試劑盒實用小技巧如下:


  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。


  2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。


  3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。


  4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的度。


  5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。


  6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。


  7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。


  8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。


  9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。


  10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。


  11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。


  12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。


  13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。


  14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。


  15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要換槍頭,即使吸取標準品溶液。


  16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。


  17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

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