大鼠Elisa試劑盒實驗原理及請求
發布時間:2020-11-25瀏覽次數:1124返回列表
大鼠Elisa試劑盒試驗原理:
大鼠Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA).已知Caspase-3濃度的標準品、未知濃度的樣品參加微孔酶標板內進行檢測。先將Caspase-3和生物素符號的抗體一起溫育。洗刷后,參加親和素符號過的HRP。再經過溫育和洗刷,去除未結合的酶結合物,然后參加底物A、B,和酶結合物一起作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Caspase-3的濃度呈比例關系。
大鼠Elisa試劑盒樣本處理及請求:
1. 血清:室溫血液天然凝固10-20分鐘,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如呈現沉積,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的請求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。檢查細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml擺布。經過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
5. 安排標本:切開標本后,稱取分量。參加必定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本消融后依然堅持2-8℃的溫度。參加必定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充沛。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢查,其他冷凍備用。
6. 標本收集后盡早進行獲取,獲取按有關文獻進行, 大鼠Elisa試劑盒獲取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行實驗,可將標本放于-20℃保留,但應防止重復凍融。
大鼠Elisa試劑盒注意事項:
1. 大鼠Elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。






