紫外-可見分光光度計工作原理結構與功能

工作原理

分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。

分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用標準光圖譜再結合其它手段進行定性分析。

根據Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。

結構與功能

由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示系統五大部分組成。

光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區，一般為鎢燈和鹵鎢燈，波長范圍是350~1000nm；氣體放電光源用于紫外光區，一般為氫燈和氘燈，連續波長范圍是180~360nm。

單色器：功能是將光源產生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計的心臟部分。

吸收池：又稱比色皿，供盛放試液進行吸光度測量之用，其底及兩側為毛玻璃，另兩面為光學透光面，為減少光的反射損失，吸收池的光學面必須完全垂直于光束方向。根據材質可分為玻璃池和石英池兩種，前者用于可見光光區測定，后者用于紫外光區。

檢測器：是將光信號轉變為電信號的裝置，測量吸光度時，并非直接測量透過吸收池的光強度，而是將光強度轉換為電流信號進行測試，這種光電轉換器件稱為檢測器。