采用HILIC色譜柱TSKgel Amide-80測定甜菜堿的含量

甜菜堿（Betaine）是一種生物堿，天然存在于很多動植物體內。其分子內有3個有效甲基，作為甲基提供者參與合成蛋氨酸，在營養物質的代謝中起著十分重要的作用。甜菜堿在醫藥、化妝品、食品發酵和飼料工業等多個行業中都有廣泛的應用。

 溶液配制

樣品稀釋液：75% 乙腈-水溶液。

用樣品稀釋液將甜菜堿儲備液 (2 mg/mL) 序列稀釋得到濃度為0 μg/mL，20 μg/mL，50 μg/mL，100 μg/mL，200 μg/mL，500 μg/mL，1000 μg/mL，2000 μg/mL的標準工作液，依次由低到高進樣檢測。

 分析條件

色譜柱：TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)

流動相：乙腈-水，梯度洗脫

流速：1.0 mL/min

柱溫：30℃

紫外檢測器：205 nm

進樣量：10 μL

流動相梯度洗脫程序見下表：

 分析結果

圖2.  甜菜堿標準曲線（標準方差=0.99997）

本應用參照行業標準NY/T 2947-2016，按高效液相色譜法，采用親水作用多孔硅膠色譜柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 來測定甜菜堿的含量。分析結果表明，該色譜柱完全滿足標準中對甜菜堿分離檢測的要求。