許多童鞋都經歷過做了很多次ELISA試驗，卻還是得不出好結果。其實，實驗方法雖然成熟，但是操作的時候一不留神，結果就可能毀于一旦。接下來，小鼠ELISA試劑盒廠家淺談試驗操作中不容忽視的關鍵點，看看你有沒有忽略過以下點：

1、濃洗刷液可能會有結晶析出，ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響成果。

2、各步加樣均應運用加樣器，并常常校正其正確性，以避免實驗誤差。一次加樣時刻zui佳控制在5分鐘內，如標本數目多，引薦運用排槍加樣。

3、在細胞收集、總蛋白提取整個操作都要盡量在冰上進行。提前開離心機預冷。

4、電泳用自來水沖洗干凈后，要再用蒸餾水沖洗，晾干。

5、灌膠前玻板一定要對齊夾緊。曾有過整個下午都在漏膠花膠的慘痛經歷。

6、用膠片曝光的時候一定要快進快出，膠片可事先折個小角。膠片容易刮花，接觸的時候要特別小心，萬一劃傷了目標條帶真是心痛到說不出話。

7、小鼠ELISA試劑盒從冷躲環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝進密封袋中保留。

8、轉膜前，膜事先用甲醇激活，轉膜時zui好把轉膜槽放置在冰浴中進行轉膜。

9、孵育的時候不要好幾張膜疊在一起摩擦摩擦，這對結果也會有影響。

10、本試劑不一樣批號組分不得混用。顯色劑B請避光保留。

11、嚴厲依照說明書的操縱進行，ELISA試劑盒實驗成果斷定有必要以酶標儀讀數為準。

12、如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔榜孔的OD值），請先將樣本稀釋必定倍數（n倍）后再測定，核算時請zui終乘以稀釋倍數（×5×n）。

13、封板膜只限一次性運用，以避免穿插污染。