正常細胞/凋亡細胞/壞死細胞檢測試劑盒是采用DNA 探針雙染細胞核的方法檢測細胞的狀態。染色液A 可以透過正常細胞膜，而細胞凋亡后，細胞膜對染色液A的通透性增加，染色液B不能透過細胞膜，對正常細胞和凋亡細胞不能染色，而對壞死細胞可以染色。...

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 流式細胞儀或熒光顯微鏡 ● PBS ● 純水 ● 移液器 ● 離心機

注意事項：

● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液

體灑落。

● 細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

使用方法：

1、染色緩沖液的配制：

根據樣品數按下列比例配制染色緩沖液。取100μL試劑C加900μL無菌去離子水稀釋，混勻即成染色緩沖液。

2、收集樣本細胞，細胞數量在10×10⁵個以內。

3、用PBS洗滌細胞兩次。

4、用500μL-1mL染色緩沖液將細胞重懸。

5、加入5-10μL染色液A。

6、加入5-10μL染色液B。

7、輕輕混勻后4℃避光孵育10-20分鐘。

8、用PBS洗滌細胞。

9、用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測結果。染料A-DNA復合物的最大激發波長為350nm，最大發射波長為460nm，染料B-DNA復合物的最大激發和最大發射波長分別為488nm和615nm。

結果分析：

正常細胞為低藍色/低紅色（A+/B+），凋亡細胞為高藍色/低紅色（A++/B+），壞死細胞為低藍色/高紅色（A+/B++）。

形態學：正常細胞核形態呈圓形，淡藍色，內有較深的藍色顆粒；凋亡細胞的核呈亮藍色，或核呈分葉狀，碎片狀。壞死細胞核紅色。

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