QN0025 四環素堿試劑(60-54-8)

產品簡介
四環素堿試劑(60-54-8)由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多四環素堿試劑(60-54-8)等抗生素類產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括四環素堿在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:四環素堿
英文名稱:Tetracycline
產品貨號:QN0025
產品規格:5g
四環素是由金霉素催化脫鹵生物合成的抗生素,毒性低,為廣譜抑菌劑,高濃度時具殺菌作用。除了常見的革蘭陽性菌、革蘭陰性菌以及厭氧菌外,多數立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、非典型分枝桿菌屬、螺旋體也對本品敏感。本品對革蘭陽性菌的作用優于革蘭陰性菌,但腸球菌屬對其耐藥。用于細胞實驗,溶解后,需用一次性針頭濾器過濾除菌。
CAS:60-54-8
分子式:C22H24N2O8
分子量:444.44
儲存條件:2~8℃
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名稱:金擔子素A(AbA)
貨號:QN0001
規格:1mg
本品是從絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分離出來的環酯肽類抗生素,具有很強的抗真菌能力。在較低的濃度下(0.1~0.5 μg/ml)即可對酵母產生毒性。對其敏感的真菌種類包括:出牙酵母、粟酒裂殖酵母、光滑念珠菌、構巢曲霉和黑曲霉。作用機制在于AbA抑制了真菌生長所依賴的肌醇磷酰胺合成酶的活性,干擾鞘脂合成,從而進一步殺死菌株。編碼IPC合成酶的基因研究較多的有來自釀酒酵母菌的AUR1 基因,以及構巢曲霉的AURA基因,兩者具有同源性。通過對這些編碼基因進行突變即可使得菌株對AbA產生抗性,如AUR1-C基因。
分子式:C60H92N8O11
分子量:1100
純度:≥95%
熔點:155-157℃
儲存條件:冰袋運輸,4℃保存
AbA非常適合用作陽性克隆子篩選用的藥物選擇性標記。AbA抗性也是酵母單/雙雜交研究中理想的報告子。本品為溶于甲醇的AbA溶液,濃度為1mg/ml。具體的工作濃度取決于宿主細胞的敏感度(見表1. AbA對各種酵母菌的zuì低抑菌濃度(MIC))。
操作步驟(抗AbA的酵母轉化系統)
1)加入0.5ml過夜培養的酵母到50ml YPD培養基中(配方:1L液體培養基含有10g yeast extract,20g polypeptone, 20g D-glucose;固體培養基另外加入2%瓊脂;)。
2)30℃培養約6小時,測定OD660為1~2。使用二倍體時,測定OD660為2~4。
3)1,000×g離心5分鐘。
4)用10ml Solution A(配方:100 mM Lithium acetate,10 mM Tris-HCl pH 7.5,1 mM EDTA)懸浮沉淀,1,000×g離心5分鐘。
5)用Solution A重懸沉淀,直到OD660為150。
6)在管內分取100 μl細胞懸浮液,30℃培養1小時。
7)加入5 μg載體(環狀或線性DNA)和150 μg Carrier DNA(已經過100℃加熱10分鐘,并迅速冷卻)。
【注】:pAUR101需使用線性DNA進行轉化。使用環狀DNA會降低轉化效率甚至轉化不成功。pAUR112和pAUR123需使用完整的質粒DNA進行轉化。
8)加入850 μl Solution B(配方:取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100ml Solution A充分溶解,需要現用現配),輕輕混勻。
9)30℃培養30分鐘后,42℃培養15分鐘。
10)室溫放置10分鐘。
11)5,000 rpm離心1分鐘,用5ml YPD培養基懸浮沉淀。
12)30℃培養6小時~過夜。
13)5000~10000 rpm離心,用1~10ml 0.9% NaCl懸浮沉淀。
14)在YPD選擇培養基平板(含有一定濃度的AbA,依菌株類型而定)上接種100 μl細胞懸液。30℃培養3-4天后轉化完成。
15)挑取陽性轉化子,和/或測定轉化效率(以每微克質粒DNA轉化的菌落數來表示)。
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