YT016 綠色核酸染料

產品簡介
北京百奧萊博供應的綠色核酸染料用于科學研究,我公司的綠色核酸染料品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括綠色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:綠色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)
英文名稱:Nucleic Acid Green(2000X)
產品貨號:YT016
產品規格:1ml|5ml
本核酸綠色染料是溴化乙錠(EB)的升級替代產品,用于凝膠中DNA、RNA等核酸的染色。本品核酸綠染料具有安全(未檢測到致突變性和細胞毒性)、靈敏度高、穩定性好等優點,凝膠中的核酸在使用本產品后經約500nm波長藍光(也可以使用約260nm紫外光)激發呈現綠色熒光,適用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold為核酸染料的凝膠成像和檢測系統。
由于本品核酸綠染料在500nm左右處有zuì大的激發波長,可以使用對人體無害的藍光燈或藍光成像儀進行核酸檢測,從而避免常規的紫外檢測對核酸樣品的致突變性,以及紫外對人的眼睛和皮膚的傷害。特別在切膠回收時,使用本品核酸綠染料并用藍光燈具有很大的,不僅可以避免核酸樣品的突變,也可以避免紫外光對人體的傷害。
本品核酸綠染料比EB或SYBR Green更安全。本品核酸綠染料在遠高于其工作濃度范圍時均沒有細胞毒性及誘變性。艾姆斯氏試驗(Ames test)結果表明,即使在S9代謝活化時,也沒有檢測到致突變性。本品核酸綠染料和百奧萊博另外一種安全型核酸染料核酸紅色染料(YT015),由于它們特殊的化學結構使其難以進入細胞,從而大大降低甚至避免了染料的致突變性和細胞毒性。艾姆斯氏試驗結果表明,本品核酸綠染料比核酸紅色染料(YT015)更安全,即便在S9代謝活化時,當本品核酸綠染料濃度高達約20微克/毫升時,也沒有檢測到致突變性。而SYBR Green染料可以穿透細胞膜,進入活細胞并染色DNA。并且有報道SYBR Green可以強烈增強紫外線誘導的基因突變。
本品核酸綠染料檢測靈敏度高,對于小分子量核酸的染色效果好。本品核酸綠染料的檢測靈敏度比EB高8-10倍,在檢測低濃度、微量DNA或RNA方面比EB更佳,尤其對小分子量的DNA檢測非常靈敏。在使用浸泡染色法時,本品核酸綠染料和SYBR Gold的靈敏度相近甚至更高;與SYBR Gold不同的是,本品核酸綠染料預先配制在凝膠中也有很高的靈敏度。EB對于小分子量核酸染色效果差,而本品核酸綠染料對于小分子量核酸的染色效果很好,便于觀察酶切或PCR獲得的小分子量核酸片段。本說明書推薦使用的本品核酸綠染料濃度,其檢測效果略優于EB。如果希望獲得更高的染色靈敏度,可以適當提高本品核酸綠染料的工作濃度。
本品核酸綠染料的穩定性好,染色重復性高。含SYBR Green的凝膠核酸染色的重復性比較差,這通常是由于SYBR系列染料的穩定性差導致的。而本品核酸綠染料的穩定性很好,可以室溫長時間保存及使用微波爐加熱。本品核酸綠染料的光穩定性良好,可以在室內正常光線下操作而無需避光。由于其熱穩定性和光穩定性,含本品核酸綠染料的凝膠在核酸染色時的重復性非常好。
本品核酸綠染料可以使用和SYBR Green或EB相同的檢測體系。本品核酸綠染料具有和SYBR Green或SYBR Gold幾乎相同的光學性質,兩者的激發光和發射光都非常接近,這樣可以直接用本品核酸綠染料替換SYBR Green,以使用SYBR Green的凝膠觀察、拍照或成像系統(約500nm激發)。對于原來用于EB染料觀察的系統,可以考慮選用百奧萊博的核酸紅色染料(YT015)染料來替代EB,但也可以使用沒有致突變性的本品核酸綠染料來替代EB。使用本品核酸綠染料來替代EB,并且用EB的紫外檢測體系時,檢測靈敏度會比使用核酸紅色染料(YT015)低約4-5倍。對于既可以觀察EB也可以觀察SYBR Green的具有紫外和藍光兩種激發光的凝膠成像系統,則推薦直接用本品核酸綠染料來替換EB。本品核酸綠染料的激發光譜和發射光譜請參考下圖。

本品核酸紅染料的激發光譜和發射光譜
本品核酸綠染料的使用方法和EB一致。本品核酸綠染料可以按適當比例直接加入瓊脂糖中配制成凝膠,也可以在電泳完畢后對凝膠進行染色。前者更加方便,而后者靈敏度要更加高一些。但由于本品核酸綠染料本身已經非常靈敏,通常采用把本品核酸綠染料直接配制在凝膠中就可以了。對于一些特殊的情況,如核酸樣品量特別少的情況等,則可以考慮電泳后再對凝膠進行染色。本品核酸綠染料對于核酸的遷移率影響非常小,小于SYBR Green對于核酸遷移率的影響。
通過凝膠回收試劑盒(YT010)或酚lǜ仿抽提,可以有效去除與DNA或RNA結合的本品核酸綠染料,從而確保不會影響后續的連接、酶切、PCR、測序等常規的分子生物學用途。
儲存條件:室溫,避光,有效期一年。
注意事項:
1. 使用藍光燈來檢測本品核酸綠染料染色的核酸膠時,需要注意避免使用一些實為紫外燈的假冒偽劣的藍光燈,以減少紫外線對于核酸樣品和人體的傷害。比較簡單的判斷方法是,對于EB或核酸紅色染料(YT015)染色的核酸膠,藍光燈照射后是不會出現熒光條帶的,而僅對于本品核酸綠染料染色的核酸膠,藍光燈照射后才會出現熒光條帶。如果對于EB或核酸紅色染料(YT015)染色的核酸膠照射后也能觀察到熒光條帶,則說明使用的藍光燈實際為紫外燈。
2. 本品核酸綠染料和EB一樣作為熒光染料均需避光保存,但在使用過程中的常規室內光照不會影響其使用效果。
3. 制備好的本品核酸綠染料瓊脂糖凝膠,在4oC避光條件下通常可以保存3-5天。
4. 本品核酸綠染料瓊脂糖凝膠再次熔化使用時,為取得更好的觀察效果,需要添加適量本品核酸綠染料。
5. 電泳之后的凝膠不建議重復使用。
6. 電泳后再使用本品核酸綠染料染色的凝膠一般不需要脫色,如果發現背景太高,可以使用不含核酸酶的水進行脫色處理。
7. 本品核酸綠染料和核酸紅色染料(YT015)除了可以染色雙鏈DNA外,也可染色單鏈DNA和RNA。核酸紅色染料(YT015)對單鏈核酸的染色靈敏度約為對雙鏈DNA染色靈敏度的一半。核酸紅色染料(YT015)對單鏈核酸的染色靈敏度約為本品核酸綠染料的5倍。
8. 如果使用聚丙烯酰胺凝膠,請使用浸泡染色法染膠,并延長染色時間至30分鐘-1小時。
9. 如果觀察到條帶彌散或者分離不理想,建議使用浸泡染色法染色以確認是否與染料有關。如果浸泡染色法染色后仍然出現類似的問題,說明與染料無關,請嘗試以下方法:使用新鮮配制的電泳緩沖液、降低核酸的上樣量、降低染料的濃度、降低瓊脂糖濃度、選用更長的凝膠、降低電泳電壓一倍以上并延長凝膠電泳時間以改善電泳效果、使用更薄的梳齒等。
10. 本產品兼容常用的電泳緩沖液,例如TAE和TBE。
11. 本品核酸綠染料適用于約500nm或260nm激發的成像系統,如果使用普通的適用于核酸紅色染料(YT015)或EB的紫外燈或成像系統(約300nm激發),也能較好地觀察到熒光,但強度會略弱一些。
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