北京百奧萊博供應(yīng)的組織細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒用于科研試驗(yàn)，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多組織細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括組織細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：組織細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Tissue cell genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：MT0046
產(chǎn)品規(guī)格：50T

本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液，可快速可靠從組織和細(xì)胞樣本中純化出高純度的基因組DNA。應(yīng)用本試劑盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反應(yīng)、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組成：

組分	規(guī)格
gDNA LB1	3ml
gDNA BB2	30ml
Washing Buffer（已含乙醇）	55ml
蛋白酶K（20mg/ml）	1ml
Nuclease Free H2O	10ml
吸附柱	50套
2mL Nuclease Free收集管	50個(gè)

保存條件：室溫避光保存，有效期1年。

應(yīng)用實(shí)例：

圖：應(yīng)用百奧萊博組織DNA提取試劑盒提取小鼠肌肉組織DNA。

操作方法：

1．樣本處理（1.5ml EP管中處理）
  培養(yǎng)貼壁細(xì)胞（10⁵～10⁷個(gè)）：胰酶消化完畢后，離心收集細(xì)胞沉淀，加入170μl水重懸細(xì)胞沉淀。通常獲得1～10μg基因組DNA。
  懸浮細(xì)胞（10⁵～10⁷個(gè)）：離心收集細(xì)胞沉淀，加入170μl水重懸細(xì)胞沉淀。
  全血分離的白膜層細(xì)胞：直接吸取白膜層細(xì)胞 170μl，不足情況下用水補(bǔ)足到 170μl。通常獲得 1～10μg 基因組DNA。
  組織樣品(1～10mg)：用液氮研磨粉碎，加入到 170μl 水中，漩渦混合均勻。其它研磨粉碎法制備的樣品，可直接取170μl 勻漿物。通常獲得 5～40μg 基因組DNA。
  塊狀組織(1～10mg)：挑取一塊置于 1.5ml EP管中，加入170μl 水，可用剪刀盡可能剪碎或勻漿研磨。通常獲得5～40μg 基因組DNA。
2．向上述準(zhǔn)備好的樣品溶液中加入50μl gDNA LB1 和10μl RNase A 漩渦混合均勻，56℃水浴鍋中消化 5 min。
3．消化完畢后，向上述裂解中加入20μl 蛋白酶漩渦混合均勻，繼續(xù)放置到 56℃水浴鍋中消化 30分鐘（細(xì)胞）、6h或過夜（組織樣品）。
4．消化完畢后，13000rpm離心15s，去未消化的細(xì)胞組織殘?jiān)?br /> 5．吸取上清 200～250μl 到新的1.5ml EP管中。 加入500μl gDNA BB2上下顛倒混合 1分鐘 后。直接倒入到吸附柱中，13000rpm離心1分鐘。倒掉廢液。
6．向吸附柱中加入500μl Washing Buffer，13000rpm離心15s。重復(fù)此步驟一次。
7．將吸附柱重新放回離心機(jī)，13000rpm 空離心2分鐘，將殘留的乙醇徹底甩干。
8．將吸附柱芯放入到 2ml Nuclease-Free 收集管中，向吸附柱芯中加入50~150μl Nuclease Free H2O，室溫放置2分鐘，13000rpm離心1分鐘，洗脫液即為基因組DNA，冷凍保存。

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名稱：海洋動(dòng)物DNA提取試劑盒(柱式提取)
貨號(hào)：BTN130401
規(guī)格：50次
本試劑盒是在柱式動(dòng)物DNA提取試劑盒(BTN71206)試劑盒基礎(chǔ)上優(yōu)化改良而得，專門針對(duì)海洋動(dòng)物的基因組DNA提取的試劑盒，可用于魚類、蝦類、貝類、蟹類等海洋動(dòng)物和水產(chǎn)動(dòng)物的荃因組DNA提取，可以有效去除海洋動(dòng)物組織中的蛋白、脂肪及其他有機(jī)化合物等雜質(zhì)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 使用本試劑盒提取的基因組DNA可適用于各種常規(guī)分子生物學(xué)操作，如:酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等試驗(yàn)。
2. 操作簡(jiǎn)單安全，1小時(shí)內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA，純化過程中不需要使用苯酚氯fǎng等有機(jī)試劑。
3. 應(yīng)用廣泛，適用于多種動(dòng)物細(xì)胞和動(dòng)物組織等。
4. 高，質(zhì)量和國(guó)外同類試劑盒相當(dāng)，價(jià)格更低。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脫液	15ml
說明書	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存(蛋白酶K溶液需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前請(qǐng)先在溶液C和通用洗柱液中加入無水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

1. 切取不多于30mg的組織材料，放入裝有200μL溶液A的離心管中，渦旋振蕩15秒。注意：根據(jù)提取的組織不同，起始量也稍有不同，腮的細(xì)胞量較大，一般建議提取量不超過20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客戶自備，BTN3160)，振蕩15秒，室溫放置5分鐘。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，渦旋混勻，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。在56℃下放置，直至組織完全溶解，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠，再進(jìn)行下一步驟。注意：不同組織裂解時(shí)間不同，通常需0.5-2小時(shí)即可完成。扇貝組織0.5小時(shí)基本可裂解完全，蝦和魚類組織1小時(shí)。每小時(shí)振蕩混合樣品2-3次，每次振蕩混勻15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分顛倒混勻，70℃放置10分鐘，溶液應(yīng)變清亮，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。注意：加入溶液B時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，一般70℃放置時(shí)會(huì)消失，不會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮，說明細(xì)胞裂解不徹底，可能導(dǎo)致提取DNA 量少和提取出的DNA 不純。
4. 加入200μl 無水乙醇，充分顛倒混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
5. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)離心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放回收集管中。
6. 向離心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。
8. 重復(fù)操作步驟7。
9. 將吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)離心2分鐘，倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
10. 將吸附柱轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μl 通用洗脫液，室溫放置2-5分鐘，12000rpm(～13,400×g)離心2分鐘，將溶液收集到離心管中。注意：通用洗脫液的體積不應(yīng)少于50μl，體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱中，室溫放置2分鐘，12000rpm(～13,400×g)離心2分鐘。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA 降解。

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