磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒是我司眾多優質DNA提取純化之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒
英文名稱：MagBeads Gel DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0206
產品規格：96次

  本試劑盒提供了一種簡單、快速、的用于瓊脂糖凝膠DNA回收的方法。它可以從用TAE或TBE制成的瓊脂糖凝膠中回收100 bp以上的DNA片段，回收效率高達80%。溶膠液將瓊脂糖膠溶解后，磁珠選擇性的吸附DNA片段。經漂洗后，洗脫得到的DNA純度良好，可用于測序、酶切、PCR、克隆等下游實驗。

試劑盒組成：

組份	96次
Buffer MG	90ml
Buffer GW1	52ml
Buffer GW2	50ml
Buffer EB	30ml
Magbeads PN	2×1ml

自備儀器及試劑：
1、手動單管提取：恒溫混勻儀；2/15ml磁力架；異丙醇、無水乙醇
2、手動96孔深孔板提取：恒溫混勻儀；廢液抽吸系統；手動連續分液器；電動連續分液器；手動連續分液器分液管(25ml)；96孔板磁力架；異丙醇；無水乙醇

實驗前準備及重要注意事項：
1、電泳時zuì好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
2、切膠時，紫外照射時間應盡量短，以免對DNA造成損傷。
3、Magbeads嚴禁冰凍、離心。冰凍和離心可能會對Magbeads造成不可逆的損害。
4、Magbeads使用前需渦旋震蕩20秒使其充分混勻。
5、如Buffer MG中出現沉淀，請在50℃水浴鍋中重新溶解，搖勻后即可使用。
6、次使用前應按試劑瓶標簽在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇并做好標記。
7、實驗過程中，磁珠在溶液中的充分混勻對于提取的得率與純度都有很大的影響。實驗過程中務必使磁珠與溶液充分混勻。不同廠家生產的恒溫混勻儀震蕩混勻效果有一定差異，實驗過程中請注意觀察磁珠狀態。如出現磁珠貼壁等未充分混勻的現象，請用移液器吹吸混勻或調整震蕩頻率。

操作步驟：

一、手動單管操作：
1、在長波紫外燈照射下將目的條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量去除多余的瓊脂糖凝膠)，稱重后將其放入干凈的1.5ml離心管中。
2、向離心管中加入3倍膠體積的Buffer MG(如果膠塊重0.1 g，其體積為100μl)后，將其放入50℃的水浴鍋中孵育10分鐘，期間每隔3分鐘渦旋震蕩5秒鐘。
3、將離心管從水浴鍋中取出，檢測膠塊是否完全融化以及溶液是否由黃色變成紫色(如膠塊未完全溶解，將離心管放回水浴鍋中繼續孵育；如溶液顏色由黃色變成紫色，向離心管中加入10μl 3M的醋酸鈉溶液)。短暫離心后，將離心管室溫放置5分鐘。
4、向離心管中加入20μl充分混勻的Magbeads，渦旋震蕩5秒鐘后將其放入25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻5分鐘或連續顛倒混勻10分鐘。
5、將離心管放于磁力架上靜置1分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側壁后徹底棄去溶液(保持離心管固定于磁力架上)。
6、將離心管從磁力架上取下，加入750μl Buffer GW1后渦旋點震1分鐘或渦旋震蕩5秒鐘后放于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻2分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于混勻狀態)。之后將離心管放于磁力架上靜置2分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側壁后輕輕顛倒磁力架將離心管蓋上的雜質洗落后徹底棄去溶液(保持離心管固定于磁力架上)。
7、將離心管從磁力架上取下，加入750 ul Buffer GW2(使用前請檢查是否已加入無水乙醇)后渦旋點震1分鐘或渦旋震蕩5秒鐘后放于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻2分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于混勻狀態)。之后將離心管放于磁力架上靜置2分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側壁后輕輕顛倒磁力架將離心管蓋上的雜質洗落后徹底棄去溶液(保持離心管固定于磁力架上)。
8、重復步驟7。
9、保持離心管固定于磁力架上，用移液器進一步去除離心管管底和管蓋上的溶液，之后室溫放置5-10分鐘，使乙醇揮發干凈。
注意：如果離心管側壁上有液珠，可向離心管中加入750μl無水乙醇。蓋蓋后顛倒離心管(保持離心管固定于磁力架上)，之后徹底棄去無水乙醇。
10、將離心管從磁力架上取下，加入30-100μl Buffer EB。渦旋震蕩使磁珠完全懸浮于洗脫液中后將其放于50℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩洗脫10分鐘，或將離心管放于50℃水浴鍋中孵育10分鐘，期間每隔3分鐘渦旋震蕩10秒鐘。
11、將離心管放于磁力架上靜置2分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側壁后用移液器將洗脫液轉移至新的離心管中-20℃保存備用。

二、手動96孔板操作：
1、在長波紫外燈照射下將目的條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量去除多余的瓊脂糖凝膠)，稱重后將膠塊放入2ml 96孔深孔板(簡稱“深孔板”)中并記錄每孔中的樣品名稱。
2、向深孔板中加入3倍膠塊體積的Buffer MG(如果膠塊重0.1 g，其體積為100μl)，蓋蓋后將96孔板放入50℃的水浴鍋中孵育10分鐘，期間將深孔板放于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻2次，每次10秒鐘。
3、將深孔板從水浴鍋中取出放于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻5分鐘，用8通道移液器向深孔板中加入20μl充分混勻的Magbeads。之后將深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻5分鐘。
4、將深孔板從恒溫混勻儀上取下后放于96孔板磁力架上靜置2分鐘。用廢液抽吸系統或8通道移液器棄去溶液，期間避免槍頭接觸磁珠。
注意：用廢液抽吸系統去除溶液時需將真空泵調節至較小的負壓力值，使溶液以一個合適的速度被吸走,速度過快會造成磁珠的丟失。
5．用手動連續分液器或8通道移液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前檢查是否已加入無水乙醇)，之后將深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻3分鐘。
6、將深孔板從恒溫混勻儀上取下后放于96孔板磁力架上靜置2分鐘。用廢液抽吸系統或8通道移液器棄去溶液，期間避免槍頭接觸磁珠。
7、用手動連續分液器或8通道移液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前檢查是否已加入無水乙醇)，之后將深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻3分鐘。
8、將深孔板從恒溫混勻儀上取下后放于96孔板磁力架上靜置2分鐘。用廢液抽吸系統或8通道移液器棄去溶液，期間避免槍頭接觸磁珠。
9、重復步驟7-8。
10、用手動連續分液器或8通道移液器向96孔深孔板中加入500μl無水乙醇，之后將深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻1分鐘。
11、將板從恒溫混勻儀上取下后放于96孔板磁力架上靜置2分鐘。用廢液抽吸系統或8通道移液器棄去溶液，期間避免槍頭接觸磁珠。
12、保持深孔板固定于96孔板磁力架上，將深孔板倒置于干凈的吸水紙上放置2分鐘。之后將深孔板從96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒溫混勻儀上靜置5分鐘。
13、用電動連續分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB，之后將深孔板放于100℃(因該恒溫混勻儀為懸空加熱，洗脫液實際溫度在50-60℃之間)、1600 rpm的恒溫混勻儀上震蕩混勻10分鐘。
14、將深孔板從恒溫混勻儀上取下后放于96孔板磁力架上靜置2分鐘，用8通道移液器溶液轉移至96孔PCR板中蓋蓋后-20℃保存備用。

儲存條件：室溫(15～30℃)

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名稱：DNA產物快速純化試劑盒
貨號：WE0170
規格：50次|200次
  本試劑盒采用硅基質膜技術和試劑配方，通過離心吸附柱快速簡單的結合-洗滌-洗脫三步即可從PCR產物或酶反應液(酶切，連接，探針標記等)中純化回收100 bp-10 kb的DNA片段，每個吸附柱zuì高可吸附10μg的DNA，同時zuì大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等雜質。純化回收的DNA純度及濃度高，完整性好，回收率高，可直接用于測序、連接和轉化、標記、體外轉錄等分子生物學實驗。

試劑盒組成：

組份	50次	200次
Buffer PB	30ml	120ml
Buffer PS	15ml	60ml
Buffer PW(濃縮)	6ml	25ml
Buffer EB	10ml	30ml
離心吸附柱DM及收集管	50套	200套

產品特點
1、快速簡單：操作步驟少，15分鐘完成，同時可處理多個樣品，節省時間。
2、回收率高：硅基質膜技術和試劑配方保證每次zuì大量回收到純度高的目的DNA。
3、處理量大：每個離心吸附柱每次zuì多可吸附的DNA 量為10μg。

自備試劑：無水乙醇。

實驗前準備及重要注意事項：
1、所有組分可在干燥、室溫(15～30℃)環境穩定保存1年，更長時間保存可置于2- 8℃。當溶液低溫保存時,使用前需在室溫中放置一段時間，恢復至室溫后使用。
2、本試劑盒可無選擇性回收溶液中所有DNA片段，如需選擇性回收特定片段，同時去除其他不同大小片段，請選擇我公司的膠回收試劑盒(WE0168)
3、次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4、使用前請檢查Buffer PB是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀現象，可在37℃水浴幾分鐘，即可恢復澄清。
5、回收效率與初始DNA量和洗脫體積有關，初始量越少，洗脫體積越少，回收率越低。
6、所有離心步驟均可室溫下進行。

操作步驟：
1、估計DNA反應液的體積，加入5倍體積的 Buffer PB，充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油)。
注意：
1)如DNA反應體系為50μl(不包括石蠟油體積)，則加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后檢測溶液的pH值，若pH值＞7.5，可向其中加入10-30μl的3 M醋酸鈉(pH5.0)，從而將pH值調到5-7。
2、柱平衡：向已裝入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS，13000rpm(~～～16200×g)離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
3、將步驟1中所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中，室溫放置1分鐘，13000rpm離心30-60 s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
注意：吸附柱容積為750μl，若樣品體積大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)13000rpm離心30-60 s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
注意：如果純化的DNA用于鹽敏感實驗(例如平末端連接實驗或直接測序)，建議加入Buffer PW后靜置2-5分鐘再離心。
5、13000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR等)。為確保下游實驗不受殘留乙醇的影響，建議將吸附柱開蓋，置于室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。
6、將吸附柱放到一個新離心管(自備)中，向吸附膜中間位置懸空滴加30-50μl Buffer EB，室溫放置1分鐘。13000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意：
1)洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液，應保證其pH值在7.0-8.5之間(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)。
2)為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加到吸附柱中，室溫放置2分鐘，13000rpm離心1分鐘。
3)洗脫體積不應小于30μl，體積過少會影響回收效率。
4)回收＞10 kb的DNA片段時，Buffer EB應在50℃水浴中預熱，適當延長吸附和洗脫時間，可增加回收效率。

儲存條件：室溫(15～30℃)。

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