革蘭氏陽性菌基因組DNA提取試劑由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，我公司的革蘭氏陽性菌基因組DNA提取試劑品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括革蘭氏陽性菌基因組DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：革蘭氏陽性菌基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Genomic DNA extraction kit for Gram-positive bacteria
產品貨號：QN2052
產品規格：50T|100T

本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，提取革蘭氏陽性菌基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有材料，能夠專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

試劑盒組成：

組分	D1650-50T	D1650-100T
溶菌酶	3ml	5.5ml
RNase A	1m1	1m1×2
蛋白酶K	1ml	1m1×2
溶液A	10ml	20ml
溶液B	10ml	20ml
漂洗液	15m1	15ml×2
洗脫液	15m1	30m1
吸附柱	50個	100個
收集管	50個	100個
說明書	1份	1份

儲存條件：15～25℃干燥保存，有效期12個月，2℃-8℃保存時間更長。

操作步驟：
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1．取細菌培養液1ml，12000rpm 離心1min.，盡量吸除上清。
2．向菌體中加入200μl終濃度為20mg/ml的溶菌酶，用溶菌酶干粉加入緩沖液20mM Tris(pH8.0)；2mM Na2-EDTA；1.2% Triton X-100，37℃處理30min以上。(如果需要去除RNA，可加入20μl RNase A,100mg/ml溶液)
3．向菌體中加入200μl溶液A，振蕩或用移液器吹打使菌體充分懸浮，向懸浮液中加入20μl的RNase A(10mg/ml)和50ul溶菌酶，充分顛倒混勻，室溫放置30～60min。(可選作，如做第3步操作，可以將第2步離心后的沉淀用于后續實驗)。
4．向管中加入20μl的蛋白酶K(10mg/ml)，充分混勻，55℃消化30～60min，消化期間可顛倒離心管混勻數次，直至樣品消化完全為止，此時可見菌液呈清亮粘稠狀。
5．向管中加入200μl溶液B，充分顛倒混勻，如出現白色沉淀，可于75℃放置15～30min，沉淀即會消失，不影響后續實驗。如果溶液未變清亮，說明樣品消化不徹底，可能會導致 DNA的提取量以及純度降低，還可能堵塞吸附柱。
6．向管中加入200μl無水乙醇，充分混勻，此時還可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入到吸附柱中，靜置2min。
7．12000rpm離心2min. 棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
8．向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇)。12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
9．向吸附柱中加入600μl漂洗液，12000rpm離心lmin，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
10．12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續實驗如酶切、PCR等。
11．將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50～200μl經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心1min。
12．離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm 離心2min，即可得到高質量的細菌基因組DNA。

注意事項:
1．樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。
2．若試劑盒中的溶液出現沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。
3．如果實驗中的離心步驟出現柱子堵塞的情況，可適當延長離心時間。
4．洗脫緩沖液的體積zuì好不少于50μl，體積過小會影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍)，pH值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。
5．DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1.0相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。OD260/0D280比值應為1.7～1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

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名稱：柱式拭子DNA提取試劑盒
貨號：BTN80801
規格：50次
拭子是一種常用的的生物樣品取材方法，可以用于PCR等分子生物學分析。拭子取材的主要特點是快捷和非介入性(不會對對象造成傷害)，尤其適用于大規模篩查取樣和特殊群體(如兒童)和組織(如口腔)的取樣。市場上專門用于拭子樣品DNA提取的產品不多，為此我司開發了本產品。

產品特點：
1.快速柱式操作，整個過程只需要十分鐘。
2. DNA純度高，OD比值一般在1.8左右。
3. 回收率高，一般在0.5μg DNA/拭子左右。
4. 環保安全，不需要使用任何有毒的試劑(包括酚和氯fǎng)。
5. 提取的DNA能夠用于電泳、酶切、雜交檢測和PCR。
6. 本產品可以跟拭子保存液(BTN80802)結合使用，用于提取保存的樣品。

試劑盒組成：

成分	規格
無菌拭子	50只
通用上柱液	25ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 將拭子涂抹面頰的口腔內表面約十次，放入加有0.5mL通用上柱液的1.5mL塑料離心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留藥棉頭于離心管中，蓋上離心蓋后振蕩一分鐘。
3. 將上清液(約0.4mL)和拭子一起全部轉移到離心吸附柱中。
4. 12000rpm離心一分鐘后棄穿透液和拭子。
5.在離心吸附柱中加入700μl的通用洗柱液，室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中廢液。
6.室溫12000rpm離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會影響DNA的后續使用(如DNA上樣時不能沉淀到加樣孔中)。
7. 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管(自備)中，加入30-50μl DNA洗脫液，室溫放置2分鐘。
8.室溫12000rpm離心1分鐘，離心管底溶液即DNA。

附:從非凍型拭子DNA保存液保存的拭子中提取DNA(僅供參考，本產品不提供所需試劑，如果需要請另行購買)
1. 將0.5mL非凍型拭子DNA保存液加入到自備的1.5mL塑料離心管中待用。
2. 用拭子涂抹口腔內表面、鼻腔表面或其他待取樣器管的表面約十次。
3. 將拭子放入到加有的1.5mL塑料離心管中，剪去專用拭子柄部，留藥棉頭于離心管中，蓋上離心管管蓋后即可長期保存、運輸。
4. 保存或運輸結束后將藥棉頭擠干溶液后取出。
5.在剩下的溶液(約0.5mL)中加入1mL通用上柱液，顛倒混勻。
6. 先取0.75mL混合液到離心吸附柱中，室溫12000rpm離心1分鐘后棄穿透液，然后在將剩下的0.75mL混合液到離心吸附柱中，室溫12000rpm離心1分鐘后棄穿透液。
7.其余操作接柱式拭子DNA提取試劑盒操作(見上)的第5步。

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