高靈敏ECL化學發(fā)光試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品僅用于生物化學研究方面，我公司專注于免疫檢測產品的研發(fā)、生產和供應，為您提供的高靈敏ECL化學發(fā)光試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括高靈敏ECL化學發(fā)光試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱：高靈敏ECL化學發(fā)光試劑盒
英文名稱：High sensitive ECL chemiluminescence kit
產品貨號：YT060
產品規(guī)格：共100ml

本W(wǎng)estern螢光檢測試劑是一種超敏ECL化學發(fā)光試劑盒，可與二抗上耦連的辣根過氧化物酶發(fā)生化學反應，發(fā)出螢光，從而可以通過用X光片壓片或其它適當螢光成像設備檢測樣品。

本試劑盒靈敏度高，比DAB顯色的靈敏度至少高200倍，是進口品牌同類產品的幾倍甚至幾十上百倍。

本試劑系統(tǒng)發(fā)光時間長。在100微升1微克/毫升辣根過氧化物酶標記IgG中，加入100微升本試劑盒的工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液進行檢測。在暗房中，兩者均可發(fā)出肉眼可見的藍色螢光，但加入本試劑盒工作液的試管內的亮度明顯高很多。zuì初數(shù)分鐘內加入本試劑盒工作液的試管發(fā)光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的3倍。約30分鐘后，加入本試劑盒工作液的試管仍然可以發(fā)出肉眼可見的較強的藍色螢光，而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管發(fā)出的螢光已經很難用肉眼進行分辨，定量結果顯示此時加入本試劑盒工作液的試管發(fā)光強度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的試管的100倍以上。

本試劑盒的高靈敏度可以大大節(jié)省寶貴的樣品以及非常昂貴的一抗和二抗的用量。同時必須注意適當減少一抗和二抗或樣品的用量，以免獲得過深的難以比較灰度的條帶。

本試劑盒采用全新配方，更加穩(wěn)定。本試劑盒的兩種試劑37℃水浴孵育30天，和4℃保存的試劑相比，對相同樣品的檢測效果無任何明顯差異。此外本試劑盒背景很低，對PVDF膜和硝酸纖維素膜均適用。

儲存條件：4℃避光，有效期一年。

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貨號	名稱	規(guī)格
YT061	超靈敏ECL化學發(fā)光試劑盒	共100ml
YT093	Kisser封片液(不含苯酚)	10ml
ZN1874	微量BCA蛋白質定量試劑盒	1盒
ZN1906	BSA PBS緩沖系統(tǒng)封閉液(干粉)	1包
ZN1909	BSA TBS緩沖系統(tǒng)封閉液(干粉)	1包
ZN1947	防脫片玻片(APES和多聚賴氨酸雙重處理)	50片
ZN1867	超靈敏抗山羊IgG免疫組化試劑盒	3ml|6ml|12ml|50ml|100ml

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名稱：SDS-PAGE Tricine蛋白上樣緩沖液2×(變性)
貨號：ZN1875
規(guī)格：1ml×6
產品保存：-20℃保存，一年有效
產品說明：SDS-PAGE Tricine 蛋白上樣緩沖液 2×,是一種以考馬斯亮藍 G-250 為染料的2倍濃液的蛋白上樣緩沖液，試劑中含有 SDS，甘油，考馬斯亮藍 G-250，Tris-HCL緩沖液等，可用于常規(guī)的多肽和小蛋白的SDS－PAGE 變性蛋白樣品上樣。
使用方法：
1.按照1體積蛋白樣品加入1體積蛋白上樣緩沖液即1：1的比例，混合蛋白樣品和蛋白上樣緩沖液(2×)。經 100℃水浴變性3-5分鐘后即可上樣，電泳。
2.通常電泳到當考馬斯亮藍G-250染料到達膠的底端處附近即可停止電泳。
注意事項：
1．剛從冷凍保存中拿出來平衡至室溫溶解后，可能會出現(xiàn) SDS的沉淀，建議可用溫水水浴中使其溶解。
2．為了您的安全和健康，請戴一次性手套在通風廚內操作。

名稱：彩色預染超高分子量蛋白質標準(10-20次)
貨號：ZN1883
規(guī)格：100μl
產品保存：-20℃保存，一年有效。
產品特點：
銳利且穩(wěn)定的顏色。
多種顏色 – 易于凝膠中示蹤。
即用型上樣 – 無需煮沸。
免疫印跡轉膜效果好。
產品應用：
監(jiān)控 SDS-PAGE 凝膠中的蛋白遷移。
檢驗免疫印跡轉膜效率。
SDS-PAGE 凝膠和免疫印跡雜交膜上蛋白大小的粗略鑒定。
未染色預制膠中待切割目標蛋白的定位。
產品說明：
彩色預染超高分子蛋白質 marker 特異性用于大分子蛋白分析。其含有 8 種重組的高純度蛋白，表觀分子量范圍43-315kDa。這些蛋白采用3種不同的染料分別染色。彩色預染超高分子蛋白質marker是即用型產品，使用前無需加熱、稀釋或變性劑處理。
使用方法：
1.室溫或37℃融化 Ladder 幾分鐘，確保試管中的固體完全溶解，不要煮沸。
2.輕輕混勻，確保溶液完全混勻。
3.上樣：
小凝膠：5μl/泳道，凝膠厚度 0.75-1 mm。
大凝膠：10μl/泳道，凝膠厚度 1-1.5 mm。

名稱：ECM Kit(兔IgG)
貨號：ZN1926
規(guī)格：1盒
用途：適于一抗為兔IgG的Western Blotting 檢測。
保存條件：4℃可保存一年 。
Western Blotting 檢測試劑盒內容：
1.封閉試劑：10g 蛋白質干粉(脫脂奶粉)。
2.HRP 標記羊抗兔IgG：0.1ml 親和純化抗體，經過人血清吸附以去除交叉抗體。
效價 1：2000-10000。
3.ECM 顯色劑：總量 10ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每個試劑盒足夠 10 張小膜或800 c ㎡面積的膜顯色。
工作原理：
蛋白質的電泳分離是重要的生物化學分離純化技術之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下 ,向著與其電荷相反的電移動的現(xiàn)象。根據(jù)所采用的支持物不同,可分為：瓊脂糖凝膠電泳、淀粉凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。其中以聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)zuì廣泛。它的優(yōu)點為：無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出 10-9-10-12mol的樣品,
凝膠機械強度大,重復性好以及可以通過調節(jié)單體濃度或單體與交聯(lián)劑的比例而得到孔徑不同的凝膠。SDS-PAGE 是zuì常用的定性分析蛋白質的電泳方式,它根據(jù)蛋白分子大小不同，遷移速率的不同而達到分離目的，特別是用于蛋白質純度檢測和測定蛋白質分子量。
免疫印跡是將凝膠電泳的高分辨力和免疫化學檢測的特異性融為一體。免疫印跡技術先借助凝膠電泳將蛋白質抗原分離，然后將凝膠中的蛋白質轉印到膜上使之成為被分離的一個拷貝。免疫印跡為檢測樣品中是否存在目的蛋白提供一種可靠的方法，該法鑒定蛋白質的原理是根據(jù)被測蛋白能與特異性抗體結合的特性并通過相對遷移率來體現(xiàn)該蛋白的分子量。
如果想要了解樣品中是否存在某一抗原，以及該抗原的含量或該抗原多肽鏈的相對分子質量以及亞型，是否與其他蛋白結合，蛋白質的酪氨酸殘基是否發(fā)生磷酸化等有關問題均可采用免疫印跡。
免疫印跡包括多個簡單步驟，可在一到兩天完成，該方法具有，簡便，靈敏等特點。
實驗操作步驟：
1．蛋白質的樣品制備：
1)細胞培養(yǎng)蛋白質樣品的制備：
1：胰酶消化后裂解：細胞培養(yǎng)至 80%左右密度時，以含 0.25%胰蛋白酶消化,室溫，低速離心，棄上清。細胞經預冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根據(jù)細胞數(shù)量定)反復吹打。
2：皿上直接裂解：細胞培養(yǎng)至 80%左右密度時，細胞經預冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根據(jù)細胞數(shù)量定)，用細胞刮刀收集，轉移至離心管中，反復吹打。
2)組織樣品的制備：新鮮組織塊迅速置于預冷的生理鹽水中，漂洗數(shù)次，按組織凈重：裂解液=1：10的比例，加入相應體積的裂解液進行勻漿，離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理)
3)蛋白變性：處理后的樣品加入樣品緩沖液(按樣品濃度 1：1或1：2的比例)混勻，樣品置 1000C的水浴箱加熱 3-5分鐘，10000g 離心 10分鐘，取上清液。(樣品可立即使用也可以分裝凍存，-20℃可穩(wěn)定保持數(shù)月。)
2．SDS-PAGE 電泳：
1)．制 膠：①按比例配制分離膠(丙烯酰胺母液：單體：雙體=29：1)，緩緩地搖動溶液，使激活劑混合均勻，將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃中，再在液面上小心注入一層水或正丁醇，以阻止氧氣進入凝膠溶液中，37℃恒溫箱中靜置 60min。
②同前按比例配制濃縮膠，但混勻溶液時不要過于劇烈以免引入過多的氧氣。吸去不連續(xù)系統(tǒng)中下層分離膠上的水分，以連續(xù)平穩(wěn)的液流注入凝膠溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡，37℃恒溫箱中靜置60min 以上以保證完全聚合。
2)加 樣：依次加入標準品和待分析樣品。(加樣時間要盡量短，以免樣品擴散，可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應。樣品一般在 1.0mm 厚6、顯色(ECM)ECM 顯色劑配制:按 1ml 蒸餾水，加顯色劑 A、B 各 1 滴混勻。將雜交后印跡膜放入顯色盒中,加上混合好的顯色液反應約 1-5分鐘。吸去印跡膜邊緣顯色液,將一透明的玻璃紙蓋住撫平,以確保×感光膠片的干燥。印跡膜轉入暗室中使膠片曝光 30＇-5分鐘。
7、顯影，定影。 將曝光后的×感光膠片放入顯影液中沖洗至膠片上出現(xiàn)條帶或者膠片透明為止,再放入定影液中定影，膠片可長期保存。

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