YT138 Caspase 1 活性檢測試劑

產品簡介
Caspase 1 活性檢測試劑是高品質的細胞凋亡與增殖產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于生化實驗研究等領域,Caspase 1 活性檢測試劑是我司眾多優質細胞凋亡與增殖之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括Caspase 1 活性檢測試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:Caspase 1 活性檢測試劑盒
英文名稱:Caspase 1 Activity Assay Kit
產品貨號:YT138
產品規格:20次|100次
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標準曲線外可以檢測20個樣品。
試劑盒組分:
裂解液——————8ml
檢測緩沖液——————8ml
Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也稱interkeukin 1b co
本caspase 1活性檢測試劑盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 1的活性。pNA在405nm附近有強吸收。
試劑盒中提供了caspase 1催化產生的黃色產物pNA,可以作為定量caspase 1酶活性的標準品。
注意事項:
1. 須自備可以測定A405或A400的酶標儀或容量不超過100μl的分光光度檢測杯及相應分光光度計。優先考慮測定A405,如有困難可以測定A400。
2. Ac-YVAD-pNA需盡量避免反復凍融,請注意適當分裝。
3. 測定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測定試劑盒(YT034),可向百奧萊博訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測定蛋白濃度,以降低DTT對蛋白濃度測定的干擾。
4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒,請注意小心防護。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它caspase活性檢測試劑盒的裂解液通用,即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它caspase活性檢測試劑盒的檢測。
儲存條件:-20℃。
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貨號:YT135
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本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織,只要經過一步染色反應,洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。
試劑盒組份:
TdT酶——————————40μl
熒光標記液————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)————500μl
細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。注:FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫,實際上大多數情況下所謂的FITC即為fluorescein。
本試劑盒有如下優點。
(1)高靈敏度:背景染色低,陽性染色明亮,可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡,同時由于凋亡早期就有DNA斷裂,可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性:TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞,而不容易標記壞死細胞。
(3)快速:僅需約1-2個小時即可完成。
(4)方便:只需一步染色反應,洗滌后即可觀察,不必使用二抗等進行多步操作。
(5)應用范圍廣:可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂,但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開,另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂,此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下,zuì好同時檢測多個凋亡指標。
注意事項:
1. 需自備用于洗滌細胞的PBS或HBSS,用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097),用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購免疫染色固定液(YT086),同時需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購免疫染色洗滌液(YT089)。
2. 如果用于石蠟切片的檢測,需自備蛋白酶K,二甲苯。
儲存條件:-20℃。
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