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特別提示：包括20×SSC緩沖液，PH7.4在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：20×SSC緩沖液，PH7.4
英文名稱：saline sodium citrate
產品貨號：QN1056
產品規格：100mL|500mL

本品常用于Southern blot、DNA電泳等分子生物學實驗。

儲存條件：常溫

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名稱：大腸桿菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化學感受態細胞
貨號：BTN140378
規格：10*100μl
本產品來源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，從而減少對重組蛋白的降解，補充大腸桿菌缺乏的4 種稀有密碼子(AGA、AUA、CCC、CUA)對應的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系統中的表達水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3 區(DE3 區含有T7 噬菌體RNA聚合酶)，可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達，同時具有四環素，氯霉素，鏈霉素，壯觀霉素抗性。本產品由特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg。
菌株基因型為：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等

使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl，可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以100μl感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含有相應抗生素的LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。

注意事項：
1、涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
4. 誘導時，IPTG濃度可選(0.1-2mM 均可)。
5. 為獲得需要量的蛋白，zuì佳誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優化。

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