ALH154 酵母DNA提取試劑盒

產品簡介
酵母DNA提取試劑盒由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,本品質量穩(wěn)定,價位合理,需要酵母DNA提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括酵母DNA提取試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:酵母DNA提取試劑盒
英文名稱:Yeast DNA Extraction Kit
產品貨號:ALH154
產品規(guī)格:50次|100次
本試劑盒用于快速的從酵母中提取基因組DNA。在針對酵母細胞特點配制的酵母裂解液作用下, 酵母細胞被裂解釋放出基因組DNA,然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白,zuì后純凈的基因組DNA通過異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
試劑盒組份(100次):
酵母裂解液——————30ml
蛋白沉淀液——————10ml
DNA溶解液 ——————5ml
產品特點:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯fǎng等試劑。
2.快速,簡捷,整個過程可在1個小時內完成。
3.結果穩(wěn)定,產量高(比離心柱型的產量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值達1.7~1.9,長度可達50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應以及文庫構建。
操作步驟:(實驗前請先閱讀注意事項)
1. 吸取1.5ml 酵母培養(yǎng)物到一個1.5ml 離心管; 12,000rpm 離心2 分鐘,盡可能棄上清,必要時候可以用槍吸去。
2. 高速渦旋振蕩,打散重懸酵母細胞團。
3. 加入300μl 酵母裂解液,渦旋振蕩混勻,或者用1 毫升的槍頭反復吹打混勻。酵母細胞的重懸分散對下一步裂解非常重要,必須充分分散重懸。
4. 將裂解物放置在70℃水浴15-30 分鐘。如果產量低,可以適當提高水浴溫度和延長水浴時間,中間可以渦旋振蕩混勻幾次幫助裂解。
5. 冰上至少5 分鐘使回復到室溫。
6. 在回復到室溫的裂解物內加入100μl 蛋白沉淀液后,在渦旋振蕩器上高速連續(xù)振蕩混勻20 秒。混勻后可能見到一些小的蛋白團塊。冰浴5 分鐘。
7. 13,000rpm 離心5-10 分鐘。這時應該可以見到管底蛋白沉淀,也可能見到一些蛋白沉淀漂浮在液體表面。
8. 小心緩慢吸取上清到一個新的1.5ml 離心管中,不要吸到沉淀。吸取上清時,注意不要吸到管底的和漂浮在液體表面的蛋白沉淀。如果不小心將蛋白沉淀轉入新的離心管中,可再次離心2 分鐘后取上清。
9. 加入等體積的室溫異丙醇(約400μl),顛倒30 次混勻或者直到出現(xiàn)絮狀DNA 沉淀(或者白色渾濁沉淀)。
10. 12,000rpm 離心1 分鐘,在管底可以見到白色的DNA 沉淀塊,倒棄上清。
11. 加入1ml 70%乙醇,顛倒幾次漂洗DNA 沉淀,12,000rpm 離心1 分鐘, 倒去上清(注意不要把DNA 沉淀倒掉了),倒置后在吸水紙上輕敲幾下以控干殘留乙醇,還可以用槍頭小心吸掉管底沉淀周圍和管壁的殘留乙醇,空氣晾干沉淀幾分鐘。注意不要干燥過頭,否則DNA其難溶;也不能殘留太多乙醇,否則乙醇可能抑制下游如酶切反應。
12. 加入40μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,輕彈管壁混勻,可以放置在65℃溫育30-60 分鐘(不要超過一小時),也可以在室溫或者4℃放置過夜來重新水化DNA。期間不時的輕彈管壁幫助重新水化DNA。
13. 加入10-15μl RNase A(10mg/ml),或者1-2μl RNase A(100mg/ml)顛倒混勻,37℃溫育30-60 分鐘去除殘留RNA。該步驟主要作用為去除殘留的RNA,如果殘留RNA多,可以適當延長時間。如果殘留RNA不影響實驗,可略去該步驟。如果殘留的RNA酶可能影響實驗,也可以用等體積酚/氯fǎng抽提去除,然后用標準的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃,如果要長時間存放,可以放置在-20℃。
儲存條件:室溫,有效期12個月。
本制品別名:酵母基因組DNA提取試劑盒
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