酸酚是高品質的RNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科學研究，我公司專注于RNA提取純化產品的研發、生產和供應，為您提供的酸酚質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括酸酚在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：酸酚
英文名稱：Acidic Phenol
產品貨號：BTN100803
產品規格：100mL

本品是將重蒸餾用乙酸鈉酸性緩沖液充分飽和而得，pH在4-5之間，不會再吸收樣品的水分，可以直接用于RNA提取。

儲存條件：常溫運輸和保存、避光。有效期一年。

疑難解答：
Q：離心后為何酚相在下面？
A：苯酚的比重是1.071，水飽和苯酚的比重更低，只比純水稍重。如果水溶液中有較高濃度的鹽和其他成分(細胞裂解后也會釋放出大量的如核酸，糖分等細胞成分)，其比重很容易超過苯酚，在此情況下離心，苯酚將在下層，水相將在上層，取樣時需要十分小心。如果要使苯酚相在下層，可以使用比重更大的酚-lǜ仿-異戊醇混合液。

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本試劑盒是在柱式植物RNA提取試劑盒(BTN71203)的基礎上經過配方和流程優化得到的無lǜ仿升級產品，它結合了植物RNA提取試劑盒的性、快捷性以及無lǜ仿處理的安全性。

試劑盒特點：
1. 免酚和lǜ仿處理，操作安全可靠。
2. 簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。
3. RNA 純度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數植物中的多糖污染。
4. 目前已測試過上百種植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA 合成等實驗。
6. 高于進口的柱式植物RNA提取產品。

試劑盒組成：

成分	規格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA 洗脫液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算組織細胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物葉片、或50-100mg植物種子、或200-500mg植物果實。
2. 先將新鮮植物組織剪切成小塊(保存在RNAhold中的植物組織需用紙吸去RNAhold液體后再剪切成小塊)，放入10-15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎植物組織，硯磨完后加入1mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 將勻漿物或硯磨物轉移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。有的植物組織(比如果實)含有大量水份，勻漿液會多于1mL，轉移時也只取1mL。
4.室溫12000～15000g離心3～5分鐘，管底沉淀為細胞破碎物。
5. 將上清液(約0.6mL)轉移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中。
6. 加入等體積的溶液B，充分顛倒混勻。如果有沉淀產生(對某些植物，屬于正常現象)，千萬不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
7. 將一半的溶液(如果有沉淀，則先混勻)轉移到離心吸附柱中，13000-15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液(如果有沉淀，則先混勻)轉移到同一離心吸附柱中，13000-15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。一般樣品如此洗滌兩次即可，但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀產生，則需要洗三次，每次加入的通用洗滌液的量分別為0.4、0.3和0.3mL。
10.室溫離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
11. 將離心吸附柱轉移到RNase-free 收集管中，加入50-100μL RNA 洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
12. 13000-15000g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA產量產率測定：將5-10μl RNA 溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進而計算出RNA的產量(濃度X 體積)和產率(RNA產量/組織用量)。
15. RNA 純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之間(具體數值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關)，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染，但一般不影響RT-PCR等反應。

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