細菌RNA提取試劑盒是高品質的RNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，本品質量穩定，價位合理，需要細菌RNA提取試劑盒等RNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括細菌RNA提取試劑盒(柱式吸附去除DNA)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：細菌RNA提取試劑盒(柱式吸附去除DNA)
英文名稱：Bacterial total RNA Extraction Kit
產品貨號：ALH029
產品規格：20次|50次

本試劑盒是在無苯酚、lǜ仿RNA快速提取技術基礎上，又采用基因組DNA清除柱技術確保有效清除gDNA殘留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反轉錄PCR、熒光定量PCR等實驗。獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶，然后裂解混合物通過一個基因組DNA清除柱，基因組DNA被清除而RNA穿透濾過。濾過的RNA用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物，蛋白等雜質去除， zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。

試劑盒特點：
1.完全不使用有毒的苯酚，lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.快速，簡捷，單個樣品操作一般可在30分鐘內完成。
3.獨特研發成功基因組DNA清除柱技術確保有效清除gDNA殘留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反轉錄PCR、熒光定量PCR等實驗。
4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9～2.0，基本無DNA殘留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實驗。

試劑盒組份：

組份	20次	50次
TE (PH8.0)	6ml	6ml
溶菌酶	20mg	20mg
裂解液RLT Plus	10ml	25ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5 ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套
基因組DNA清除柱和收集管	20套	50套

注意事項：

1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉速可以達到13000rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 樣品處理量不要超過基因組吸附柱和和RNA吸附柱處理能力，否則造成DNA殘留或產量降低。開始摸索實驗條件時，如果不清楚樣品DNA/RNA含量時寧可使用較少的樣品處理量，將來根據樣品試驗情況增加或者減少處理量。
3. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4. 關于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA 提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA 的微量殘留（DNase 消化也無法做到無殘留），本試劑盒提取產品，由于采取了本公司獨特的緩沖體系和基因組DNA 清除柱技術，大多數DNA 已經被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反轉錄PCR 和熒光定量PCR。個別特殊情況如DNA 含量過于豐富造成殘留或者要進行嚴格的mRNA 表達量分析熒光定量PCR，我們建議在進行模板和引物的選擇時：
1) 選用跨內含子的引物,以穿過mRNA中的連接區,這樣DNA就不能作為模板參與擴增反應。
2) 選擇基因組DNA和cDNA上擴增的產物大小不一樣的引物對。
3) 將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔(cleanup),請聯系我們索取具體操作說明書。
4) 在步驟去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上進行DNase I處理。請聯系我們索取具體操作說明書。
5. RNA 純度及濃度檢測:
完整性： RNA 可用普通瓊脂糖凝膠電泳(電泳條件：膠濃度1.2%；0.5×TBE 電泳緩沖液；150v，15 分鐘)檢測完整性。由于細胞中70%-80%的RNA 為rRNA，電泳后UV 下應能看到非常明顯的rRNA 條帶。動物rRNA 大小分別約為5 kb 和2kb，分別相當于28S 和18S rRNA。動物RNA 樣品中zuì大rRNA 亮度應為次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否則表示RNA 樣品的降解。出現彌散片狀或條帶消失表明樣品嚴重降解。
純度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白質污染程度的指標。高質量的RNA，OD260/OD280 讀數（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之間。OD260/OD280 讀數受測定所用溶液的pH 值影響。同一個RNA 樣品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中測出的OD260/OD280 讀數1.8-2.1 之間，在水溶液中所測讀數則可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA 不純。
濃度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀釋n 倍，用RNase-free 水將分光光度計調零，取稀釋液進行OD260, OD280 測定，按照以下公式進行RNA濃度的計算：終濃度（ng/μl）= (OD260)×(稀釋倍數n)×40

儲存條件：室溫，有效期6個月

本制品別名：細菌RNA快速提取試劑盒|快速提取細菌RNA試劑盒

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