KFS378 過氧化物和過氧化酶熒光探針Amp

過氧化物和過氧化酶熒光探針Amp是高品質(zhì)的探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于科研目的,我公司的過氧化物和過氧化酶熒光探針Amp品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
特別提示:包括過氧化物和過氧化酶熒光探針Amplex Red,紅540/590nm在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:過氧化物和過氧化酶熒光探針Amplex Red,紅540/590nm
產(chǎn)品貨號(hào):KFS378
產(chǎn)品規(guī)格:500T(≈2.31mg)
Amplex Red 是一種靈敏度高,穩(wěn)定性好的過氧化氫探針,也是一種過氧化物酶的熒光底物。在HRP 中,的Amplex Red 與過氧化氫以1:1 進(jìn)行反應(yīng),產(chǎn)生具有高熒光的試鹵靈。由于和很多不同的酶反應(yīng)都會(huì)產(chǎn)生過氧化氫,因此Amplex Red 可以用來檢測各種酶的活性。
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BTN90604B PCR法DNA探針生物素標(biāo)記試劑盒 5次
BTN91104B Denhardt溶液(非同位素探針) 250mL
BTN130907 脫脂奶粉 50g
BTN100809 SSPE溶液,20× 250mL
BTN8091 超級(jí)雜交液(不含甲酰胺) 100mL
BTN80915B 超級(jí)雜交液(含50%甲酰胺) 100mL
BTN120644 聚乙二醇 100g
BTN131207 小牛胸腺DNA溶液 1mL
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名稱:TdT加尾法DNA探針標(biāo)記試劑盒
貨號(hào):BTN9060
規(guī)格:5次
本試劑盒是基于TdT末端轉(zhuǎn)移酶能夠在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而設(shè)計(jì),該反應(yīng)的示意圖如下:

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.快速,15分鐘即可完成標(biāo)記反應(yīng)。
2. 不但可用于單鏈DNA和DNA Oligo標(biāo)記,還可用于3′突出的雙鏈DNA標(biāo)記,但后者標(biāo)記效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地gāo辛標(biāo)記的核苷酸等)。
4. 提供不帶標(biāo)記核苷酸、帶生物素標(biāo)記核苷酸和帶地gāo辛標(biāo)記核苷酸三種選擇。
5. 同時(shí)提供非標(biāo)記的dATP,用戶可以用其調(diào)節(jié)加尾長短和標(biāo)記核苷酸摻入比例。
6. 標(biāo)記的探針可用于電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)、原位雜交(ISH)、Northern Blot(不推薦用于低豐度RNA檢測)、小RNA Northern、Southern Blot(不推薦用于單拷貝基因檢測)、菌落雜交、斑點(diǎn)印跡雜交分析等。
試劑盒組成:
| 成分 | 規(guī)格 |
| TdT緩沖液,5× | 20μl |
| TdT(末端轉(zhuǎn)移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 標(biāo)記核苷酸 | (A、B、C不同,見注) |
| 超純水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
注:A型用于自選標(biāo)記,用戶需自備標(biāo)記核苷酸,本產(chǎn)品不提供標(biāo)記核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量離心管中按下表設(shè)置一個(gè)20μl體系的標(biāo)記反應(yīng)(如果需要標(biāo)記更多探針,請(qǐng)?jiān)黾訕?biāo)記體積而不要增加探針DNA的濃度):
| 成份 | 用量 |
| 探針DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
|
標(biāo)記核苷酸,1mM (A型需自備標(biāo)記核苷酸) | 1μl |
| dATP,2mM | (見下注) |
| TdT末端轉(zhuǎn)移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超純水 | 補(bǔ)到20μl |
注:dATP可以不加,但這樣得到的加尾全部是標(biāo)記核苷酸,由于空間阻礙,靈敏度不一定zuì佳。如果雜交效果不好,摻入一定比例的dATP到標(biāo)記核苷酸中,以控制標(biāo)記的密度,提高比活。具體比例如何可以自己優(yōu)化。
2. 37℃反應(yīng)15分鐘,延長到30分鐘也可以。如果沒有非標(biāo)記核苷酸存在,一般可以加尾3-5個(gè)Biotin或DIG標(biāo)記的核苷酸(標(biāo)記物空間阻礙抑制延長);如果有在加尾反應(yīng)中加入一定比例的非標(biāo)記核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本試劑盒只提供dATP而已),每條探針上可加上約100個(gè)核苷酸,平均含5個(gè)標(biāo)記核苷酸
3. 70℃ 10分鐘滅活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE電泳+銀染(相關(guān)試劑需要另購)檢測標(biāo)記效率,帶標(biāo)記的探針泳動(dòng)速度將低于沒標(biāo)記的探針。
5. 如果是非同位素標(biāo)記,探針不需純化可以直接用于雜交。如果需要純化非同位素標(biāo)記的探針,請(qǐng)不要酚/lǜ仿抽提,因?yàn)榉峭凰貥?biāo)記物一般會(huì)使探針DNA進(jìn)入有機(jī)相而丟失。
6. 使用時(shí)需將探針以1-8 ng/μL的終濃度加入到雜交液中(如果探針是雙鏈DNA,加入前還需熱變性)。如果不立即使用,非同位素標(biāo)記的探針DNA可-20℃長期放置一年,同位素標(biāo)記的探針DNA不能放置。
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