QN4060 明膠-瓊脂糖凝膠4FF

產品簡介
明膠-瓊脂糖凝膠4FF是高品質的分離試劑類產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科學研究,我公司的明膠-瓊脂糖凝膠4FF品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括明膠-瓊脂糖凝膠4FF在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:明膠-瓊脂糖凝膠4FF
英文名稱:Gelatin Sepharose 4FF
產品貨號:QN4060
產品規格:25ml
明膠-瓊脂糖凝膠4FF是采用溴化氰法將明膠耦合到瓊脂糖凝膠4FF基質上的一種親和層析填料。明膠是一種高分子糖蛋白,在多種細胞的表面和許多細胞外液(包括血漿)中都發現了明膠的存在,它可以特異性的結合纖維連接蛋白。明膠瓊脂糖凝膠4FF是專為純化或除去纖維連接蛋白的一種親和層析填料。
技術參數:
基質:高度交聯的4%瓊脂糖凝膠
顆粒大小:45~165μm
平均顆粒大小:90μm
配基:牛明膠衍生物
配基密度:每ml填料約5mg明膠
連接化學基團:CNBr
zuì大流速:200cm/h
耐壓:0.1MPa
pH穩定性:pH3.0~10.0
化學穩定性:所有常用的水相緩沖液
保存液體:20%乙醇
保存溫度:4~8℃
使用方法:
1.準備凝膠
① 讓凝膠和所有的試劑達到工作時的溫度。
② 配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
③ 明膠瓊脂糖凝膠4FF是保存在20%的乙醇溶液中,取適量凝膠,清洗掉20%的乙醇,抽干。用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
2.裝柱
① 將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
② 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
③ 打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
3.平衡讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
4.上樣
① 樣品用平衡液配制,常用磷酸鹽緩沖液或Tris-HCl緩沖液,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
② 一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質,再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
5.洗脫明膠-瓊脂糖凝膠4FF可以采用不同的方式洗脫纖維連接蛋白:
① 使用含有溴鹽的緩沖液,例如溴化鈉或溴化鉀,并在低于平衡緩沖液pH值的條件下洗脫。一種推薦的洗脫緩沖液是:0.05M的醋酸鈉,pH值5.0,含1M的溴化鈉或溴化鉀。
② 可以在平衡緩沖液中加入8 M的脲,來洗脫吸附在凝膠上的纖維連接蛋白。
③纖維連接蛋白還可以通過在平衡緩沖液中添加精氨酸來進行洗脫。
6.再生根據樣品的性質,明膠瓊脂糖凝膠4FF可以再生,以達到重復使用的目的。可以采用2~3柱體積的高pH值(0.1M的Tris-HCl,0.5M NaCl,pH值8.5)的緩沖液和低pH值(0.1M NaAC,0.5 M NaCl,pH值 4.5)的緩沖液交替清洗凝膠。一個周期重復3次,然后用3-5倍柱體積的平衡緩沖液平衡,即可進行下次試驗。如果在純化過程中使用了洗滌劑或變性劑(如8 M尿素),那么這些洗滌劑也可以用于洗脫緩沖液中。2.7清洗在一些應用中,像變性的蛋白質或脂類這樣的樣品,在再生過程沒有被洗脫下來,可以通過加入一些洗滌劑,例如:0.1%的Triton X-100,在37℃的條件下洗一會。立即用至少5倍柱體積的結合緩沖重新平衡。2.8儲存明膠-瓊脂糖凝膠4FF應儲存在4~8℃,20%的乙醇溶液中。特別注意:上樣之前,樣品必須去除色素,否則色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
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分離試劑,層析介質。每毫升配體含10-16mg刀豆蛋白A。每毫升結合20-45mg甲狀腺球蛋白。能純化糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、帶甘露糖或葡萄苷殘基的膜囊泡、lgM,激素,脂蛋白等。
儲存條件:4℃
名稱:葡聚糖凝膠G-25
貨號:QN4106
規格:25g|100g|500g
葡聚糖凝膠G-25利用分子篩作用,進行緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子;工業脫鹽。球蛋白分離范圍1000~5000。
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外,粗級也可用于批量工藝。
葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學降解)。它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的,在強酸中凝膠骨架的糖昔鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應避免使用。
葡聚糖疑膠并不熔融,可以在濕態、中性pH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它的色譜性質。干態的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化。葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯度。
技術參數:
性 狀:白色微球,多孔
凝膠類型:凝膠過濾填料,親水型凝膠
結構成分:交聯右旋糖酐
粒 徑:細顆粒20~80μm,中顆粒50~150μm,粗顆粒100~300μm
工作PH值:2~13
操作溫度:4~40℃
球蛋白分離范圍:1000~5000
保存條件:4~25℃
使用方法:
1.葡聚糖凝膠預處理:
在室溫下,將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用蒸餾水煮沸至少1小時直至充分溶脹,凝膠體積不再變化。
注:在溶脹前,加入蒸餾水攪拌后使其自然沉降,沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復多次漂洗將其除去,防止層析時阻塞凝膠柱,影響流速。
2.裝柱:
將溶脹好的凝膠根據裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態裝柱,并避免柱內產生氣泡或斷層; 裝柱要均勻,可在凝膠耐受的操作壓下裝柱,裝好的凝膠柱可以檢測柱效,檢測過濾柱裝填是否合格。
凝膠層析分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度:分級分離時,一般需要100cm左右長的層析柱,柱高與直徑之比為20~100:1,柱高過高時,凝膠擠壓變形阻塞會引起較大的反壓,應當盡可能避免;分組分離(例如脫鹽)時用短柱,柱高控制在40~50cm以下,柱高與直徑的比約為5~10:1。
3.平衡:
上樣前用平衡液平衡層析柱至少3~5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
4.上樣:
分級分離時上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1~2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積。
樣品溶液如有雜質或沉淀應過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5.洗脫方法:
可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化;
6.在位清洗(CIP)
凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
7.保存
凝膠柱暫時不用,可將其回收,一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干,可加入0.02%疊氮化鈉防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生長。
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