QN4059 DEAE葡聚糖凝膠A-25

DEAE葡聚糖凝膠A-25的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的分離試劑類產(chǎn)品,本制品用于科研目的,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多DEAE葡聚糖凝膠A-25等分離試劑類產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括DEAE葡聚糖凝膠A-25在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:DEAE葡聚糖凝膠A-25
英文名稱:DEAE-Sephadex A-25
產(chǎn)品貨號(hào):QN4059
產(chǎn)品規(guī)格:25g
DEAE葡聚糖凝膠A-25利用離子交換作用,主要用于純化低分子質(zhì)量蛋白、多肽、核苷酸及巨大分子等。
凝膠類型:離子交換填料,弱堿型
結(jié)構(gòu)成分:交聯(lián)右旋糖酐
粒徑:40~120μm
工作PH值:pH2.0~pH9.0
操作溫度:4~40℃
總離子交換量:3~4mmol/g干膠
交換載量:
1mg thyroglobulin/ml drained medium;
30mg HSA/ml drained medium;
140mg α-lactalbumin/ml drained medium
性狀:白色微球,干燥狀
儲(chǔ)存條件:室溫
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規(guī)格:100ml
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貨號(hào):QN4083
規(guī)格:100ml|500ml
瓊脂糖凝膠4FF是在瓊脂糖凝膠4B的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)兩次交聯(lián)形成的高交聯(lián)基質(zhì),微球的化學(xué)穩(wěn)定性及物理性能顯著增強(qiáng),剛性增加,流速更快,使產(chǎn)品處理時(shí)間大大縮短。可用于生物大分子的凝膠層析。本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
本產(chǎn)品具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L的NaOH在位清洗,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠色譜純化。
理化指標(biāo):
| 項(xiàng)目 | 指標(biāo) |
| 基質(zhì) | 4%交聯(lián)瓊脂糖 |
| 排阻限 | 6×104~2×107(球蛋白) |
| 形狀 | 球形 |
| 粒徑 | 45~165μm |
| zuì高流速 | 300cm/h* |
| 耐壓 | 0.30 MPa |
| pH適用范圍 | 2~14(短時(shí)間,在位清洗),2~12(長(zhǎng)時(shí)間) |
| 化學(xué)穩(wěn)定性 |
以下溶液中40℃下穩(wěn)定: 2mol/L NaOH; 70%EtOH; 30%異丙醇; 30%乙腈; 1%SDS; 6mol/L鹽酸胍; 8mol/L尿素 |
貯存:產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方,不能冷凍,用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
注意事項(xiàng):本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
使用方法:
1.裝柱
凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。
① 讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
② 選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
③ 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
④ 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑤ 打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩(wěn)定。
⑥ zuì好用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
2.平衡
讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。
3.上樣
① 樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。
② 介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
③ 上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
4.洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5.再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
6.注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
7.在位清洗
① 對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M NaCl去除。
② 對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH去除。
③ 對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
8.注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
9.去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除:
① 2倍柱體積的70%乙醇;
② 2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;
③ 1倍柱體積4M尿素;
④ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
10.消毒
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
注意:上樣之前,樣品必須去除色素,否則色素會(huì)被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
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